B部分研究调节DAPK1表达是否影响Aza所致d HL-60细胞凋亡。首先,实验分为五个组(1)对照组(control);(2)对照质粒组(control plasmid)转染对照质粒;(3)DAPK1 plasmid组转染DAPK1ΔCa M~(-/-)质粒;(4)对照si RNA组(negat确认细节ive si RNA)转染对照小干扰RNA;(5)DAPK1 si RNA组转染DAPK1小干扰RNA。转染48小时后收集各组细胞,western blotting检测各组细胞中DAPK1表达情况,确认质粒或si RNA是否转染成功。之后实验分为六个组(1)对照组(conSelleckchem PCI-32765trol);(2)Aza组4μM Aza刺激细胞72小时;(3)DAPK1 plasmid组细胞转染DAPK1ΔCa M~(-/-)质粒;(4)DAPK1 plasmid+Aza组细胞转染DAPK1ΔCa M~(-/-)质粒,再用4μM Aza刺激细胞72小时;(5)DA寻找更多PK1 si RNA组细胞转染DAPK1小干扰RNA;(6)DAPK1 si RNA+Aza组细胞转染DAPK1小干扰RNA,再用4μM Aza刺激细胞72小时。处理结束后收集各组细胞,TUNEL染色和流式细胞术评估细胞凋亡水平,同时采用western blotting检测细胞内NF-κB p65,p NF-κB p65,Bcl-2和Bax表达情况。