875±1.126,P<0.05);12h(4.375±0.916)较6h有所升高,但仍低于NC组(P<0.05);24h时评分又出现降低(2.125±0.835,P<0.05);之后评分逐渐升高,3d神经功能评分(5.75±0.886,P0.05),6h时稍升高(79.54±0.715, P<0.05),3d开始下降(82.13±0.593,P<0.05),7天明显下降(81.24±1.010,P<0.05)开始增高,24h(0.909±0.052,P<0.05)达到高峰,随后逐渐降低。p38MAPK在神经元和神经胶质细胞都有表达,尤其在脑室两侧和脉络丛表达明显,在液压冲击脑损伤后随着时间延长其表达逐渐增强,12h(0.400±0.034,P<0.05),24h(0.585±0.026,P<0.05),3天(0.746±0.040,P<0.05),7天(0.917±0.040,P<0.05)。P-p38MAPK则主要表达于细胞核,在正常脑组织中几乎不表达,液压冲击脑损伤后其表达升高,且变化趋势与AQP4变化趋势相似,6-12h(0.292±0.022,0.499±0.019,P<0.05)逐渐升高,24h(0.911±0.049,P<0.05)达高峰,3天后出现下降(0.666±0.037,P<0.05),7d后明显降低(1.554±0.199),但仍高于正常(P<0.05),7d后明显降低(1.673±0.100),但仍高于正常(P<0.05),7d(2.373±0.064,P<0.05),7d后降低(0.429±0.088),仍高于对照组(P<0.05)。各亚组间比较均有差异(P<0.05)。SBI组和SBII组组间比较,仅于12h(4.875±0.835,5.125±0.835)、24h(2.500±0.926,2.75±0.707)、3d(6.125±0.99,6.38±0.744)差别有统计学意义(P<0.05)。与NC组相比,TBI组,SBI组和SBII组除7天(9.000±0.00,8.375±0.744,8.500±0.535,8.625±0.518)外差异有统计学意义(P0.05);6h时明显低于TBI组,差异有统计学意义(P0.05),12h时三组间比较均有差异(P<0.05),脑水含量分别为(81.89±0.58,80.77±0.79,79.48±0.76),24h时脑水含量均达最高,且三组间比较均有差异(P0.05)。
selleck激酶抑制剂 4免疫组化 与TBI组相比,SBI组和SBII组AQP4蛋白表达在1h差异均无统计学意义(P>0.05),余各时间点均低于TBI组,以12h(0.535±0.027,0.489±0.333,0.583±0.016)、24h(0.856±0.023,0.800±0.038,0.909±0.052)、3d(0.776±0.025,0.708±0.018,0.804±0.016)最为明显(P<0.05)。SBI组和SBII组两组间比较于12h、24h、3d差别有统计学意义(P<0.05)。SBI组和SBII组两组间比较,仅于12h、24h、3d差别有统计学意义(P0.05)外,在其余各时间点SBII组p38MAPK表达都低于SBI组(P0.05),其他时间点差别均有统计学意义(P<0.05),但SBI组与SBII组间组间比较,于12h、24h、3d差别均有统计学意义(P0.05),但TBI组与SB
点击此处 II组、SBII组与SBI组比较差别有统计学意义(P<0.05),其余各时间点三组间差异均有统计学意义(P0.05),7d时SBII组与TBI组无差别(P>0.05),其余各时间点三组间比较均有统计学意义(P
研究目的评估SB203580联合白藜芦醇诱导人类肺腺癌A549细胞凋亡的作用,并探索其具体的分子机制。 研究方法 1.建立稳定的细胞凋亡模型:不同浓度的SB203580(0,1和10μM)和/或白藜芦醇(0,50,75,100和125μM)对A549细胞进行处理,采用CCK-8法检测细胞活力。 2.判断细胞的死亡形式:用Annexin V/PI双染法及PI染色的方法进行流式检测,判断SB203580增强白藜芦醇诱导的A549细胞死亡是否为凋亡。 GABA drugs 3.应用流式细胞仪检测SB203580对白藜芦醇诱导的线粒体膜电位下降的影响情况。 4.免疫荧光法分析Bax、Bak在联合使用SB203580和白藜芦醇时与单独使用白藜芦醇时活化量的区别。 5.荧光底物法检测caspase在联合使用SB203580和白藜芦醇与单独使用白藜芦醇时的激活情况。 6.共聚焦荧光显像检测AIF、Smac从线粒体释放的情况。 7. Western blotting检测外源性途径中FasL的表达情况。 结果 1.不同浓度白藜芦醇可以诱导细胞呈浓度依赖性的活力下降;单加SB203580对细胞的活力没有影响,但与白藜芦醇联合使用可以显著地增加白藜芦醇诱导的细胞毒性的能力,具有统计学意义的75μM白藜芦醇和10μM SB203580被选为后继实验的浓度。 2.多种凋亡检测技术证实,SB203580促进白藜芦醇诱导的细胞死亡其具体方式为细胞凋亡。 3. SB203580增加了白藜芦醇诱导的线粒体膜电位下降; 4. SB203580增加了白藜芦醇诱导的Bax活化量,但是Bak的活化量反而下降。 5. SB203580增加了白藜芦醇诱导的caspase-9的轻微活化和caspase-3的大量活化。 6. SB203580使单加白藜芦醇时没有活化的caspase-8被激活。 7. AIF和Smac在SB203580促进白藜芦醇诱导的细胞凋亡晚期没有从线粒体中释放出来。 8. SB203580增加了白藜芦醇诱导的FasL切割。 结论 1. SB203580增加了白藜芦醇诱导的A549细胞凋亡。 2.