43%，mp：52~54℃。终产品经质谱、核磁验证为目的产物。 2、最佳的反应条件如下： （1）2,6-二羟基-3-氰基-4-三氟甲基吡啶在三氯氧磷条件下合成6-氯-2-羟基-3-氰基-4-三氟甲基吡啶。讨论了反应温度，反应时间，碱等对反应的影响。确定2,6-二羟基-3-氰基-4-三氟甲基吡啶(2)氯代的最佳的反应条件是：2,6-羟基-3-氰基-4-三氟甲基吡啶：三氯氧磷：三乙胺的摩尔比是1:10:2，反应温度65℃，反应时间19h，产率：82.2%。 （2）6-氯-2-羟基-3-氰基-4-三氟甲基吡啶在10%钯碳以及缚酸剂的条件下，合成2-羟基-3-氰基-4-三氟甲基吡啶。讨论了10%钯碳的用量，反应温度，以及碱等对反应的影响，化合物(3)还原的最佳的反应条件：10%钯碳量是化合物(3)质量的5%，最佳反应温度：35℃，产率：85.0%。
这个 结论：成功合成了目标化合物2-氯-3-氨基-4-三氟甲基吡啶，通过优化反应条件，提高了反应收率。
目的：探索wnt信号传导通路抑制剂盐霉素对富含干细胞的三阴性乳腺癌细胞亚群的治疗作用。 方法：体外培养ALDH1表达的三阴乳腺癌细胞株HCC38，将细胞分成三组，第一组加入生理盐水作为阴性对照，第二组加入不同浓度盐霉素作为实验组，第三组加入紫三醇作为阳性对照组。 1.MTT法检测抑制剂盐霉素（sinomycin）对处理后HCC38细胞体外增殖的抑制效应； 2.应用流式细胞仪检测盐霉素对细胞凋亡的影响； 3.应用无血清悬浮培养人乳腺癌细胞的微球体（mammospheres，MSs）验证HCC38细胞富含肿瘤干细胞。 4. Transwell侵袭实验证明肿瘤细胞的迁移能力。 5.Westen蛋白印迹试验检测wnt信号通路下游关键蛋白β-catenin水平。 结果：HCC38细胞在培养中可形成微球体，富含干细胞，与对照组相比，盐霉素能杀伤球体，并且与紫三醇比较盐霉素作用更明显、盐霉素能够抑制HCC38细胞的生长、诱导HCC38细胞凋亡、降低HCC38细胞细胞侵袭力、降低HCC38的蛋白表达。 结论：Wnt信号转导通路的抑制剂盐霉素通过抑制wnt下游蛋白，对富含干细胞的三阴性乳腺癌细胞具有潜在的治疗价值，可能是抑制乳腺癌干细胞的有效药物。
目的：检测Hedgehog信号通路成员Shh、Ptch和Smo在化学诱导小鼠肝癌过程中各个阶段的表达情况及其变化，初步探索该信号通路的调控机制。 方法：选取符合标准的C57BL/6J雄性小鼠95只，分为对照组（45只）和诱癌组（50只）。45只对照组小鼠给予常规标准喂养，50只诱癌组小鼠利用DEN/CCl4/Ethanol等化学物质联合诱发小鼠肝癌,观察两组小鼠生长状况，从诱癌第4周开始分别处死一批对照组和诱癌组小鼠，获取小鼠肝组织标本，之后每隔一周（即第6、8、10、12、14、16、18及20周）按期获取对照组和诱癌组小鼠肝组织或肝癌组织标本。对所获取的组织标本施行病理形态学观察，与此同时采用免疫组织化学技术、蛋白质印迹技术以及实时荧光定量PCR技术监测Hedgehog信号通路成员Shh、Ptch和Smo的蛋白以及mRNA的动态表达情况。
Tariquidar分子重量 结果：病理形态学观察显示诱癌组C57BL/6J雄性小鼠在经历了20周的化学刺激后，诱导肝细胞癌获得成功。免疫组织化学检测结果显示，诱癌组Shh蛋白开始出现弱阳性表达是在第6周，中度阳性结果出现在第16周，强阳性表达则出现在第20周；Ptch蛋白在第8周时开始出现弱阳性表达，在第16周时出现中度阳性，在第20周出现强阳性表达；Smo蛋白出现弱阳性、中度阳性和强阳性表达分别是在第10周、第16周和第20周；而正常对照组中未检测出三种蛋白的表达。蛋白质印迹法检测结果显示，诱癌组Shh蛋白从第6周开始、Ptch蛋白从第8周开始、Smo蛋白从第10周开始检测出弱表达条带，随着化学诱癌剂作用时间的延长，三种蛋白的表达量逐渐增多，表达条带逐渐增强增宽，到第20周时可以观察到表达条带显著增强，表达量达到最多，而正常对照组中却未检测出三种蛋白的表达。实时荧光定量PCR技术检测出的结果显示，Shh对照组、Ptch对照组和Smo对照组中Shh
确认细节 mRNA、Ptch mRNA和Smo mRNA的表达在各周期之间的比较，差异均没有统计学意义（P>0.05）；同一基因诱癌组中，三者的表达量均依次呈逐步上升趋势，一直到第20周时三者的表达水平均达到最高，Shh mRNA为15.986±1.784，Ptch mRNA为11.272±0.295，SmomRNA为10.185±0.716，且在Shh诱癌组、Ptch诱癌组和Smo诱癌组中每一组的后一周期小鼠肝组织中各自的表达水平普均遍高于前一周期的表达水平；与其相对应周期的正常对照组比较，诱癌组小鼠肝组织中Shh mRNA和Ptch mRNA表达从第6周开始，Smo mRNA的表达从第8周开始，明显高于同一周期正常对照组，此间差异有统计学意义（P
第一章卵巢上皮癌侧群细胞(side population, SP)研究进展 肿瘤干细胞(Cancer stem cells, CSC)被认为是肿瘤产生,耐药和复发的根本原因。SP细胞是肿瘤干细胞研究的主要方法之一,在肿瘤的发生和发展中可能起了重要作用。本章节就干细胞、侧群细胞以及肿瘤干细胞的起源和相互关系,卵巢癌干细胞及SP细胞的生物学特征,卵巢癌干细胞及SP细胞表面标志研究近况,SP细胞在卵巢上皮癌多药耐药发生发展中的作用及分子机理以及针对卵巢癌干细胞新的靶向治疗策略进行综述。 第二章卵巢癌侧群细胞流式分选方法的建立及探讨 目的：探讨分选卵巢癌细胞株SKOV3中的侧群(side population, SP)细胞的最佳染料浓度和细胞密度,建立分选SP细胞的技术路线。 方法：制备SKOV3单细胞悬液,以荧光染料Hoechst33342和7-AAD染色,维拉帕米拮抗对照,选择不同浓度的(2.