(4)分别经过6小时、24小时、3天、7天、14天的再灌注后,将三组大鼠快速切除大脑。沿冠面将前脑切片,将切片染色后观察各时间段脑梗死体积的大小,从中选取再灌注24小时的染色脑切片拍照,然后使用Image J分析软件来测量三组各切片的脑梗死体积。(5)收集三组大鼠体内海马体和大脑皮层组织,经脱蜡脱水处理后采用TUNEL方法利用原位细胞死亡检测试剂盒来检测组织系发现更多统中的DNA片段。在光学显微镜下观察并记录三组样本各自的细胞凋亡情况。(6)将三组大鼠皮层组织使用对应的酶联免疫吸附剂测定(ELISA)试剂盒分别测定TNF-α、CRP和IL-6的含量水平。(7)使用5只出生约1天的新生大鼠来分离出原代神经元细胞。神经元细胞被划分成对照组、缺氧缺糖(OGD)组和丹参酮预处理(TSN)组。TSN组中的细YH25448胞在DMEM培养基内培养5天并伴随使用5 μg/mL的丹参酮原液。随后在OGD组和TSN组中实施OGD处理,经过4小时的培养后再将基质更换为正常培养液行复氧处理。而对照组的细胞在5%CO2的条件下进行培养。(8)经处理的细胞分别接受24、48、72小时的培育。每天同时将MTT(10μl,5 mg/mL)试剂添加到各培养皿内,然后对细胞Selleck进行4小时的培育。然后应用多功能全自动定量绘图酶标仪检测各组细胞的活性,同时使用Annexin V-FITC凋亡检测试剂盒来检测各组细胞凋亡的情况。(9)分别对3个分组内的细胞进行收集,经实时荧光聚合酶链式反应(qRT-PCR)技术与蛋白质免疫印迹(Western Blot)法分别检测Bcl-2和Bax中的mRNA与蛋白质表达水平的变化并验证两者是否一致。(10)以上数据使用SPSS 19.0统计分析软件进行分析。