(4)分别经过6小时、24小时、3天、7天、14天的再灌注后,将三组大鼠快速切除大脑。沿冠面将前脑切片,将切片染色后观察各时间段脑梗死体积的大小,从中选取再灌注24小时的染色脑切片拍照,然后使用Image J分析软件来测量三组各切片的脑梗死体积。(5)收集三组大鼠体内海马体和大脑皮层组织,经脱蜡脱水处理后采用TUNEL方法利用原位细胞死亡检测试剂盒来检测组织系发现更多统中的DNA片段。在光学显微镜下观察并记录三组样本各自的细胞凋亡情况。(6)将三组大鼠皮层组织使用对应的酶联免疫吸附剂测定(ELISA)试剂盒分别测定TNF-α、CRP和IL-6的含量水平。(7)使用5只出生约1天的新生大鼠来分离出原代神经元细胞。神经元细胞被划分成对照组、缺氧缺糖(OGD)组和丹参酮预处理(TSN)组。TSN组中的细YH25448胞在DMEM培养基内培养5天并伴随使用5 μg/mL的丹参酮原液。随后在OGD组和TSN组中实施OGD处理,经过4小时的培养后再将基质更换为正常培养液行复氧处理。而对照组的细胞在5%CO2的条件下进行培养。(8)经处理的细胞分别接受24、48、72小时的培育。每天同时将MTT(10μl,5 mg/mL)试剂添加到各培养皿内,然后对细胞Selleck进行4小时的培育。然后应用多功能全自动定量绘图酶标仪检测各组细胞的活性,同时使用Annexin V-FITC凋亡检测试剂盒来检测各组细胞凋亡的情况。(9)分别对3个分组内的细胞进行收集,经实时荧光聚合酶链式反应(qRT-PCR)技术与蛋白质免疫印迹(Western Blot)法分别检测Bcl-2和Bax中的mRNA与蛋白质表达水平的变化并验证两者是否一致。(10)以上数据使用SPSS 19.0统计分析软件进行分析。

方法以不同浓度(0、10、50、100、200μg/m L)的SBE干预人胰腺癌PANC-1细胞系48h后,应用CCK-8法、流式细胞术及Annexin V/PI双染色法、Transwell细胞侵袭实验分别测定SBE对胰腺癌PANC-1细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭能力的影响;Western blot法和免疫组化方法分别检测细胞和瘤体组织中Hip抑制剂po通路关键蛋白YAP、p-YAP的表达。结果与空白组比较,不同浓度的SBE能够显著抑制PANC-1增殖、迁移和侵袭能力;动物实验结果表明,相对于对照组,SBE可显著抑制胰腺癌在裸鼠体内生长,裸鼠瘤体的体积变小、重量相对较低;免疫组化结果提示SBE可影响肿瘤组织中YAP、p-YAP蛋白的表达,Western boltPoziotinib半抑制浓度结果趋势与之一致。结论SBE可显著抑制体外胰腺癌PANC-1细胞的增殖、侵袭转移以及在裸鼠体内的成瘤能力,Hippo/YAP通路关键蛋白可能是SBE作用于胰腺癌治疗的重要靶点之一。
大多数胰腺癌病人确诊时已处于局部进展期或发生远处转移,无法接受手术治疗,预后较差。积极的药物治疗有利于延长生存期,改善生存质量。目也前,以吉西他滨(GEM)为基础的药物治疗仍是晚期胰腺癌最主要的治疗方式。对于身体状态好的病人,一线治疗可选择的方案较多,如FOLFIRINOX、GEM联合白蛋白结合型紫杉醇、GEM联合氟尿嘧啶类等;而对于身体状态相对差的病人,可选择单药GEM或氟尿嘧啶类。对于适合的病人可以在化疗基础上联合靶向治疗,如GEM联合厄洛替尼等。二线治疗基于一线治疗方案后选择,推荐纳米脂质体伊立替康、GEM、氟尿嘧啶类等。

结论胆碱能抗炎通路通过抑制mPTP开放产生抗炎作用,从而减轻心肌细胞缺氧复氧损伤。
目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对胰岛细胞的保护作用及机制。方法实验分为正常对照组,IL-1β组,IL-1β+EGCG1组(低浓度),IL-1β+EGCG2组(高浓度)。CCK8检测细胞活性,酶联免疫吸附实验(ELISA)方法检测MIN6细胞基础胰岛IWR-1-endo化学结构素和葡萄糖刺激的胰岛素分泌量,Hochest染色及流式细胞术检测细胞凋亡,JC-1流式细胞术检测线粒体膜电位,比色法测定细胞腺嘌呤核苷三磷酸(ATP)含量,化学荧光法检测细胞活性氧簇(ROS)活性。结果与正常对照组相比,IL-1β组细胞活性降低,基础和葡糖糖刺激胰岛素分泌量显著减少,细胞凋亡明显增加,同时测得细胞线粒体膜电位很少降低,ATP含量减少,提示细胞线粒体功能损伤,并且ROS活性增加。给予低浓度和高浓度EGCG作用后,与IL-1β组相比,细胞活性明显提高,基础和葡糖糖刺激胰岛素分泌量增加,细胞凋亡率显著减少,线粒体膜电位增加,ATP含量增加,同时ROS活性降低。且IL-1β+EGCG2组作用更强。结论 EGCC可减轻IL-1β诱导的MIN6不细胞细胞凋亡率,其机制可能与提高细胞ATP的含量,线粒体膜电位及降低ROS活性有关。
目的探讨槟榔碱对L-02细胞损伤及其可能的作用机制。方法将处于对数生长期的L-02细胞分别暴露于终浓度为0(对照)、3、9、18、36、75、150、300 mg/L槟榔碱溶液培养24 h,检测细胞活性、乳酸脱氢酶(LDH)漏出情况和丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活力及线粒体膜电位。

卵巢癌TNM分期和最大肿瘤大小是无复发生存期的独立预后因素,差异有统计学意义(P值分别为<0.001和=0.028),TNM分期越晚(Ⅲ/Ⅳ期)、最大肿瘤大小越大(>12cm)的卵巢癌患者较Ⅰ/Ⅱ期和最大肿瘤大小<12cm的卵巢癌患者的无复发生存期短。MK-5108分子量研究结论NUPR1蛋白在卵巢癌原发灶组织和转移灶组织中呈高表达,与卵巢癌临床不良预后相关,NUPR1的检测有望成为卵巢癌的诊断和预后评估的新指标。第二部分NUPR1在卵巢癌细胞中的分子生物学功能的研究研究目的1.检测NUPR1CAL-101分子量在卵巢表面上皮(ovarian surface epithelium,OSE)细胞及卵巢癌细胞系(A2870和SKOV3细胞)中的表达;2.构建NUPR1低表达及过表达的卵巢癌细胞系,并探讨其对卵巢癌细胞的增殖、迁移和侵袭等生RXDX-101物学行为的影响;3.利用体内成瘤实验来验证NUPR1对卵巢癌细胞成瘤的影响。材料与方法1.研究材料卵巢表面上皮细胞、A2780细胞、SKOV3细胞、293T细胞均购自中国上海中科院细胞库。siRNA委托上海吉玛生物有限公司完成,质粒的构建和慢病毒包装委托上海吉凯基因化学技术有限公司完成,转染部分由自己完成。

采用统计方法对病历费用进行测算与分析,以此确定相应胃癌诊疗方式的费用标准。结果符合纳入标准的胃癌病历为305份,确定了区域内各胃癌诊疗方式付费标准。结论基于胃癌治疗临床路径制定的胃癌诊疗付费标准对规范医疗工作者的诊疗行为和控制不合理医疗费用应该能够发挥重要作用。
目的探讨中性粒细胞淋巴细胞比值(NLR)及上皮转录调控因子(ESE)-3转录因子在胃癌组织中的表达及其与预后的并且关系。方法选择初次行胃癌根治术患者82例,采用免疫组化法检测胃癌组织及癌旁组织ESE-3、CD133蛋白表达情况,并检测术前NLR及血小板与淋巴细胞比率(PLR)水平,分析胃癌组织ESE-3、CD133及NLR、PLR与患者临床病理特征相关性,采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线,分析NLR及ESE-3对胃癌患者预后的影响。结果胃癌组织中ESE-https://www.selleck.cn/products/elacridar-gf120918.html3阳性表达(81.7%)显著高于癌旁组织(54.9%,P<0.05),阳性颗粒主要定位于细胞核中;胃癌组织中CD133阳性表达为51.2%,癌旁组织均为阴性;胃癌组织ESE-3表达阳性率与患者TNM分期及浸润深度明显相关,胃癌组织CD133表达阳性率、NLR高水平及PLR高水平与患者肿瘤分化程度、TNM分期及浸润深度明显相关(P<0.05),而与患者性LY294002花费别、年龄、肿瘤大小、淋巴结转移无相关(P>0.05);胃癌组织中ESE-3阴性表达患者术后生存时间明显优于阳性表达患者,NLR低水平患者术后生存时间明显优于NLR高水平患者(P<0.05)。结论 NLR及ESE-3表达与胃癌发生发展及预后密切相关,ESE-3可能是胃癌一种潜在的预后标志物和治疗靶点。
背景胃癌是全球范围内常见的恶性肿瘤,目前全球胃癌发病率居第5位,死亡率居第3位,每年约有95.1万新发病例及72.3万死亡病例。

研究方法1.通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)对STR中的组成药物进行检索从而获取其化学成分,根据口服生物利用度(Oral bioavailability,OB)≥30%和类药性(drug likeness,DL)≥0.18作为条件筛选候选化合物,同时结合STR质谱分析的结果得到中药的潜在化合物,将其所对应的靶点基因与GEO数据库筛选出selleck化学药品来的HBV-HCC相关的靶点基因进行配对后,获得STR和HBV-HCC两者共同拥有的关键靶点,即为STR作用HBV-HCC的潜在靶点。利用R软件中“cluster Profiler”安装包对其进行GO功能和KEGG通路富集分析,并构建“中药-化学成分-关键靶点-通路”网络关系图。2.采用MTT法观察STR对人肝癌细胞株Hep已经 G2.2.15、Hep G2、MHCC97-H增殖作用的影响,采用细胞划痕及Transwell实验观察STR对三株人肝癌细胞株的迁移能力的影响。3.建立人肝癌细胞株Hep G2.2.15裸鼠皮下成瘤模型,待瘤体积达100-200mm~3时将其随机分为五组,即STR低、中、高剂量组,阴性对照组,阳性药对照组,分别进行灌胃,每Selleck天一次,连续给药25天,记录裸鼠状态、生长情况,测量瘤体积及裸鼠体重。最后一天给药结束,眼球取血,剥离瘤体,测量瘤重,进行统计学分析,取肝肾组织,HE染色观察肝肾形态学改变。4.取STR给药组和阴性对照组各3个肿瘤组织样本进行转录组学测序(RNA-seq),通过文库构建、数据过滤及基因差异表达分析,筛选出差异表达基因(DEGs),并以火山图、聚类热图形式表现,并进行GO功能注释和KEGG信号通路富集。

结论 256层螺旋CT(MSCT)动态增强及多模式后处理技术对结肠癌病人的术前诊断及分期具有重要价值,为临床选择合理的治疗方案及术前评估提供帮助。
目的研究长链非编码RNA FEZF1-AS1在结肠癌组织和细胞中的表达及对结肠癌细胞增殖、克隆形成、迁移和侵袭等能力的影响。方法1.应用RT-qPCR(实时荧光定量PCR)法检测结肠癌组织及其对应癌旁正常组织selleck化学药品中FEZF1-AS1的表达水平,并对FEZF1-AS1的表达水平和结肠癌患者临床和病理参数之间的相关性进行分析。2.应用RT-qPCR法检测5株结肠癌细胞系(SW480,HCT116,DLD-1,RKO和HT29)和正常肠上皮细胞NCM460中FEZF1-AS1的表达水平。3.应用MTS法、克隆形成法、划痕愈合实验、TranswellSelleck NVP-AUY922迁移和Matrigel侵袭实验检测敲低FEZF1-AS1基因对结肠癌细胞SW480和HCT116增殖活性、克隆形成能力、迁移能力和侵袭能力的影响。结果1.RT-qPCR实验数据显示,与癌旁正常组织相比,结肠癌组织中FEZF1-AS1表达明显上调,其表达水平与T分期(肿瘤浸润深度)以及TNM分期呈正相关。2.RT-qPCR实验数据显示,screening assay与正常肠上皮细胞NCM460相比,SW480,HCT116,DLD-1和HT29结肠癌细胞株中FEZF1-AS1表达明显升高,而结肠癌细胞株RKO中FEZF1-AS1表达未见明显差异。3.MTS实验数据显示,敲低FEZF1-AS1基因可导致结肠癌细胞SW480和HCT116增殖能力明显降低。4.克隆形成实验检测结果显示,敲低FEZF1-AS1基因可导致结肠癌细胞SW480和HCT116的克隆形成能力明显受到抑制。

在体内研究部分,我们通过构建SMMC-7721-R肝癌荷瘤裸鼠模型,对复方免疫脂质体的抑瘤作用进行了评价,并利用主要器官的HE染色来考察复方免疫脂质体对荷瘤裸鼠主要脏器的毒性作用,最后用Western Blot对肿瘤组织的蛋白表达水平进行了进一步验证。研究结果1.我们构建的获得性Sorafenib耐药肝癌细胞系(SMMC-7721-R细胞)不仅或者在体外增殖抑制、流式凋亡中均表现出对Sorafenib的明显抵抗作用,还在裸鼠皮下移植瘤中表现出对Sorafenib抵抗作用。这表明获得性Sorafenib耐药人肝癌细胞系的构建成功。2.蟾毒灵在24 h、48 h和72 h的IC_(50)分别为1.52±0.23μmol/L、0.38±0.13μmol/L、0.20±RIP kinase抑制剂0.02μmol/L,蜂毒素在24 h、48 h和72 h的IC_(50)分别为5.32±0.23μmol/L、1.64±0.54μmol/L、1.13±0.20μmol/L,不同时间组别间的差异均有统计学意义(P<0.05)。Compu Syn分析结果显示蜂毒素和蟾毒灵具有协同抗肝癌作用,1.0μmol/L蜂毒素+0LXH254DMSO溶解度.2μmol/L蟾毒灵为最优协同药效配比,与流式细胞仪凋亡检测结果相吻合。3.RNA-Seq转录组结果提示,蜂毒素和蟾毒灵联合使用后转录组出现明显的改变,差异表达基因数量明显增多。进一步通过KEGG分析发现蜂毒素和蟾毒灵可能通过调节内质网应激来发挥抑制肝癌Sorafenib耐药的协同作用。4.蟾毒灵在PBS中的溶解度随着温度的升高而升高,但蟾毒灵的溶解速度均较慢、溶解度较低,12小时才基本达到饱和。

方法将该探针过通过尾静脉注射至胃癌荷瘤裸鼠体内,在小动物活体成像系统(IVIS)中进行成像。进一步取出肿瘤组织及重要脏器在IVIS中观察。采集探针组裸鼠血液进行血常规、生化检测,并与对照组比较。结果胃癌荷瘤裸鼠经尾静脉注射该探针后,在IVIS系统中仅15min肿瘤部位就出现荧光信号,且随着时间推移肿瘤区域荧光信号逐渐增强;离体肿瘤组织在IVIS中荧光信也号也明显增强,且该荧光信号可被MMP-2抑制剂阻断。探针组裸鼠血常规与对照组相比,红细胞计数(RBC)及血小板计数(PLT)减少具有统计学意义(P<0.05),分别为(4.88±0.05 vs 5.20±0.04)×1012/L、(612±8.60 vs 657.5±4.95)×109/L。而白细胞计数(WBC)、血红蛋白(Hselleck chemicalsB)与对照组相比无统计学差异(P>0.05)。探针组裸鼠生化结果与对照组相比,谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)升高具有统计学意义(P<0.05),分别为(49.66±3.39 vs 34.75±0.64)U/L、(32.27±2.94vs 17.18±0.21)U/L。而碱性磷酸酶(ALP)及γ-谷氨酰转肽酶(GGT购买抑制剂)及总胆红素(TB)与对照组相比无统计学差异(P>0.05)。探针组裸鼠血肌酐(Scr)结果与正常裸鼠相比升高(P<0.05),为(55.72±1.80 vs 54.10±0.50)mmol/L。而血糖(GLU)、总胆固醇(TC)与对照组无统计学差异(P>0.05)。结论小分子荧光探针Dab-GPLGVRGY-FITC可以通过识别MMP-2对胃癌荷瘤裸鼠的肿瘤组织形成荧光图像,该探针可能有一定的肝肾毒性。

因此,我们通过引入碳纳米管,实现了低场强纳秒脉冲诱导的高效率肿瘤细胞凋亡,并发现理解了其部分作用机制,不仅弥补了纳秒脉冲在肿瘤治疗领域应用的部分缺陷,还帮助业界更好地理解其作用原理,为未来使用该技术手段治疗癌症提供了有力支持。
细胞凋亡是由基因控制的细胞自主有序的主动死亡过程。它在疾病的发生发展中起着重Selleck Barasertib要的作用。目前所知的细胞凋亡途径主要有3条线粒体通路、死亡受体通路和内质网通路。作者就近10年来有关细胞凋亡通路的研究作一综述。
细胞凋亡是由基因控制的细胞自主有序的主动死亡过程,其与动脉粥样硬化关系密切,直接影响血管内血栓形成、粥样硬化动脉的形态和结构以及斑块的稳定性。本文就PI3K inhibitor Library dmso������近年来中药对动脉粥样硬化细胞凋亡信号传导通路及调控蛋白的干预研究做一综述。
旨在揭示山羊副流感病毒3型(CPIV3)感染气管上皮细胞后是否可诱导细胞发生凋亡,并对细胞凋亡的信号通路进行初步探究。本研究将CPIV3病毒液接种气管上皮细胞,在12、24、36、48、72和96 h收JQ-EZ-05购买集培养物上清检测病毒增殖滴度;通过形态学观察CPIV3诱导气管上皮细胞病变(CPE)情况;采用Annexin V-FITC/PI双染细胞凋亡检测试剂盒和Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9活性检测试剂盒检测凋亡水平及相关指标;荧光定量PCR检测细胞凋亡分子mRNA表达水平;Western blot分析激活型Caspase-3蛋白表达变化情况。