结论:Sv-cystatin不仅具有抑制细胞外基质的作用,而且还具有细胞免疫调节、增殖分化与凋亡、基因转录和细胞内信号转导等多种生物学功能。”
“血管生成抑制剂是目前抗肿瘤药物的研究热点,本文综述了新生血管形成的机制和调控,以及抗血管生成疗法在抗肿瘤领域的研究状况,并着重叙述了糖类化合物作为血管生成抑制剂的研究进展以及相关的构效关系。”
“目的:观察小檗通常碱对小鼠原代肝细胞核因子4α(HNF4α)表达及葡萄糖代谢关键酶葡萄糖激酶(GK)活性的影响,探讨小檗碱治疗2型糖尿病的分子机制。方法:采用改良两步灌流法培养小鼠原代肝细胞,用不同浓度的小檗碱(0,1,3,10,30,100μmol.L-1)和1 mmol.L-1二甲双胍干预24 h后,采用RT-PCR方法检测HNF4αmRNA表达http://www.selleckchem.cn/products/AG-014699.html;采用Western-blot方法检测HNF4α蛋白的表达,同时检测GK的活性。结果:与阴性对照组相比,小檗碱在10,30,100μmol.L-1时能够明显促进HNF4αmRNA及蛋白的表达,二者同时在30μmol.L-1时达到最大值(HNF4αmRNA相对吸光度为0.48±0.20,蛋白相对吸光度为3.47±0.86,P<0.01点击此处);在10,30μmol.L-1时明显上调GK活性,同时在30μmol.L-1时达到最大值(0.080±0.073,P<0.05);而二甲双胍对HNF4αmRNA、蛋白的表达及对GK活性的影响则与阴性对照组无明显差异。结论:小檗碱改善糖代谢的作用可能与其调节肝细胞核因子4α的表达进而调节GK活性有关。"
“目的研究木犀科木犀属植物日香桂干燥花的化学成分。方法采用柱色谱法分离纯化单体化合物,通过波谱鉴定其结构。

因此,针对EGFR与血管内皮生长因子受体(VEGFR)或其配体的分子靶向治疗药物目前已成为晚期胰腺癌药物治疗的临床研究重点。加拿大国立癌症研究所完成的1项Ⅲ期随机双盲临床研究(NCICPA.3)结果显示,接受酪氨酸激酶抑制剂厄洛替尼与吉西他滨联合方案治疗的晚期胰腺癌患者的1年总生存率与中位生存期均优于仅接受吉西他滨单药治疗者,分别为24%vs17%与6.4个月OTX015vs5.9个月,且差异有显著性。目前美国FDA已经批准了厄洛替尼联合吉西他滨治疗晚期胰腺癌的适应证。然而,厄洛替尼作为二线药物用于经吉西他滨治疗失败的胰腺癌,尚未获临床研究结果的支持。目前已完成的其他多项临床研究结果,尚未能证实其他酪氨酸激酶抑制剂或针对EGFR及其配体的单克隆抗体对晚期胰腺癌的疗效。虽然Ⅱ期临床研究结果提示了抗新生血Selleck管药物贝伐单抗对晚期胰腺癌的治疗作用,但其疗效未获Ⅲ期随机临床研究结果的支持。旨在研究吉西他滨与厄洛替尼基础上加用贝伐单抗对晚期胰腺癌疗效的AVITA研究,也未能证实该组合可进一步延长患者的中位生存期。其他分子靶向治疗药物如索拉非尼、axitinib与舒尼替尼等药物在晚期胰腺癌的应用目前亦仍有待临床研究结果的证实。本文基于目前已发表的JAK抑制剂最佳临床证据,就目前在晚期胰腺癌治疗中已获初步进展的抗表皮生长因子及抗新生血管治疗的相关研究及临床应用予以介绍。”
“目的:建立芒果苷的高效液相色谱测定法,研究其在Caco-2细胞上的转运特征。方法:利用MTT实验筛选出芒果苷在Caco-2细胞中的安全浓度,然后用Caco-2细胞单层模型研究芒果苷的转运特征。采用HPLC法检测药物浓度,考察时间、药物浓度、P-糖蛋白抑制剂对芒果苷在Caco-2细胞上转运的影响。

进行临床疗效及凝血指标观察。结果溶栓组疗效明显优于对照组。结论急性脑梗死在时间窗6h的患者应用大剂量尿激酶治疗疗效快、效果好、相对安全,在基层医院可以推广。”
“目的观察复方甘草酸苷联合依巴斯汀治疗慢性荨麻疹的临床疗效、安全性。方法80例患者随机分为治疗组和对照组,两组患者均每日口服依巴斯汀10mg,治疗组同时口服复方甘草酸苷2片,3次/d,获悉更多均治疗观察4周,评价疗效。结果治疗组和对照组的有效率分别为100%和71.1%,两组有效率比较差异具有统计学意义(P<0.01)。结论复方甘草酸苷联合依巴斯汀治疗慢性荨麻疹疗效可靠、安全性好,可供临床选用。"
“目的观察小剂量尿激酶联合低分子肝素治疗时间窗外脑梗死的疗效与安全性。方法选符合要求的急性时间窗外脑梗死患者还有60例,随机分为A组和B组各30例,两组患者均采用常规治疗,A组在此基础上应用小剂量尿激酶,同时应用低分子肝素,共5d。B组应用低分子肝素,剂量、用法同A组。其后两组均采用常规治疗15d。观察两组患者的临床疗效及安全性。结果两组患者临床疗效间差异有统计学意义(P<0.01)。两组无一例并发脑出血。两组患者治疗前神经功能BGB324小鼠缺损评分间差异无统计学意义(P>0.05),治疗后差异有统计学意义(P<0.01)。结论小剂量尿激酶联合低分子肝素治疗时间窗外脑梗死,方法简便易行,安全有效,可在基层医院推广应用。"
“目的观察单磷酸阿糖腺苷联合复方甘草酸苷治疗带状疱疹的疗效和安全性。方法随机将60例患者分为2组,治疗组用单磷酸阿糖腺苷联合复方甘草酸苷,对照组只用单磷酸阿糖腺苷,比较2组止疱、干涸、止痛时间及后遗神经痛发生率。

结论PKCα通过MDR-1参与神经胶质瘤细胞的多药耐药。”
“目的分析人消化道癌组织蛋白表达谱的差异并分离纯化食管癌组织中HSP70-多肽复合物。方法提取人食管、胃及大肠的癌组织、癌旁组织和正常组织的蛋白质,采用聚丙烯酰胺凝胶电泳方法进行电泳分析;同时以食管癌组织为材料,通过层析柱分离纯化HSP70-多肽复合物。结果相同器官的不同组织中不同分子量蛋白的种类基本一致,但丰度则表现出差异此网站;同时分离到食管癌细胞的HSP70-多肽复合物。结论不同分子量的蛋白质在不同组织中表达的丰度不同,可能与组织细胞生命活动状态相关。HSP70-多肽复合物的分离为提取肿瘤HSP70-多肽复合物提供了具体方法,为深入研究和利用HSP70蛋白奠定了基础。”
“目的:研究糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)抑制剂TDZD-8对大鼠肝脏热缺血再灌注损伤的保护作用。方法Adriamycin体外:将大鼠随机分为4组:A组(假手术+空白对照)、B组(假手术+TDZD-8)、C组(I/R+空白对照)和D组(I/R+TDZD-8,实验组)。通过肝门阻断30min建立大鼠缺血再灌注模型,分别于再灌注后2、12h,每组各选取8只大鼠,测定血清ALT、AST含量,行肝组织形态学检测;TUNEL检测肝细胞凋亡,计算凋亡指数(AI);采用实时定量PCR方法检测肝BcGSK1120212说明书l-2mRNA转录水平。结果:预先给予TDZD-8组在缺血再灌注期各时相点肝组织结构受损相应较轻,血清ALT、AST含量及凋亡指数均较低(P<0.05);Bcl-2mRNA则显著上升。结论:GSK-3β抑制剂可显著减轻肝脏缺血再灌注损伤程度,上调肝脏Bcl-2mRNA转录,抑制肝细胞凋亡。”
“目的考察国产与进口复方甘草酸苷片的质量。方法采用高效液相色谱法测定3个主成分的含量及有关物质,采用桨法测定溶出度,并计算累积溶出百分率。

观察OGD和OGD-酸中毒对培养神经元的存活率和Caspase-3活性的影响及TK预处理、缓激肽(bradyki-nin,BK)预处理、ASIC1a特异性和非特异阻断剂预处理对OGD-酸中毒损伤神经元上述指标的影响,并检测细胞外信号调节激酶(ERK)、C-Jun-N末端激酶(JNK)和磷酸肌醇-3激酶/蛋无白激酶B或Akt(PI3K/Akt)信号通路抑制剂对TK作用的影响。结果显示:OGD-酸中毒对神经元的损伤明显重于单纯OGD,阻断ASICs的激活能提高OGD-酸中毒神经的存活率、降低Caspase-3活性;TK和BK预处理能促进OGD-酸中毒损伤神经元存活、抑制Caspase-RAD001 solubility dmso3激活;阻断ERK和PI3K/Akt信号通路能够抑制TK促OGD-酸中毒损伤神经元存活效应。结果表明,ASICs的激活参与了OGD-酸中毒神经元损伤过程;TK对OGD-酸中毒神经元的保护作用可能是拮抗了ASICs介导的谷氨酸非依赖的神经元毒性作用,并可能与ERK和PI3K/AktPS-341供应商信号通路的激活有关。”
“丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)是细胞内主要的信号转导系统之一。p38MAPK属于MAPK亚家族中的重要一类,其介导的信号转导通路不仅在炎症、应激反应中具有重要作用,还参与细胞的存活、分化和凋亡等过程。近年来发现该通路在调节消化道肿瘤的发病、耐药、转移中起重要作用。

方法对26例尿激酶静脉溶栓治疗急性脑梗死的临床资料进行回顾性分析。结果治愈5例(19.2%),显效5例(19.2%),有效10例(38.5%),总有效(治愈、显效加有效)20例(76.9%),无效2例(7.7%),加重1例(3.8%),并发脑出血死亡3例(11.5%)。结论尿激酶静脉溶栓治疗急性Selleck SB431542脑梗死有效,溶栓越早,疗效越好。”
“目的探讨尿激酶(UK)治疗早期脑梗死的疗效及安全性。方法将40例急性脑梗死患者随机分为治疗组及对照组。对照组给予钙拮抗剂、自由基清除剂、血小板抑制剂、抗凝剂,同时口服肠溶阿司匹林每日75mg,生理盐水或5%葡萄糖注射液加血塞通0.不要6g静脉滴注;治疗组在对照组基础上加用UK。比较两组的疗效及神经功能缺损积分(NDS)。结果治疗后观察组的NDS1、24h及2、7、14d的改善情况、总有效率均优于对照组,差异有统计学意义(<0.05)。治疗过程中两组患者均未发生全身出血及其他副反应。结论UK溶栓治疗早更多期脑梗死,在使用得当的情况下,对早期脑梗死溶栓有较满意的疗效,无明显出血,且能减轻病残程度,明显提高脑梗死的治愈率和患者的生存生活质量,值得广大基层医院推广使用。”
“[目的]为秦巴山区钮子茎的综合开发利用提供理论依据。[方法]以石油醚为溶剂,采用超声法对秦巴山区野生的钮子茎粉末进行提取,得石油醚提取物,利用GC-MS分析对其成分进行分离、鉴定。

当ACV/GCV浓度进一步升高时,T细胞活率下降不明显。TK+T细胞对GCV敏感,T细胞活率从(97.9±2.7)%下降至(38.4±5.5)%,差异有统计学意义(P<0.05);但是对ACV不敏感,T细胞存活率从(98.4±2.7)%下降至(73.8±7.4)%,差异无统计学意义(P>0.05)。IC50值测定结果Selleck显示,SR39TK+T细胞对GCV和ACV的敏感性高于TK+T细胞。结论表达HSV1-SR39TK的T细胞对GCV和ACV的敏感性均较HSV1-TK高。突变型HSV1-TK在体外可促进前体药物介导的杀伤小鼠T细胞的作用。”
“目的:研究草珊瑚Sarcandra glabra正丁醇部位的化学VX-809浓度成分及抑菌活性。方法:采用Diaion HP-20,Sephadex LH-20,MCI CHP-20及硅胶等柱色谱法对草珊瑚正丁醇部位的化学成分进行分离纯化,根据理化性质及现代波谱技术确定化合物的结构。采用滤纸片法,记录化合物对金葡菌株24 h抑菌效果。结果:分离鉴定了7个化合物:5,7,GSK11202123′,4′-四羟基-6-C-β-D-葡萄糖二氢黄酮碳苷(1),山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖酸苷(2),嗪皮啶(3),异嗪皮啶(4),异嗪皮啶-7-O-β-D葡萄糖苷(5),山柰酚(6),异美五松针二氢黄酮(7)。其中化合物2,5,6对金葡菌株的抑菌环直径分别为:(14.67±0.08),(11.14±1.06),(8.26±1.26)mm,化合物4对金葡菌株无抑菌活性。

我们使用膜片钳技术,观察到去极化阶跃脉冲刺激的SMCs上出现外向K+电流,该电流对paxilline(BKCa的一种特异性抑制剂)敏感,因此认为该电流主体为BKCa电流。相对正常对照大鼠,辐照处理大鼠SMCs的BKCa电流幅度明显减小。这种通道抑制效应在辐照后第9天表现显著,且在整个30天的可能实验期间是逐渐增强的。辐照处理大鼠的SMCs的血管舒张能力可能因此而减弱。在本实验中,PCL-Q有效地恢复了辐照后SMCs的BKCa功能。而PCL-Q的组分,单一的槲皮素或”"空白”"的脂质体(PCL)恢复BKCa功能的能力较二者的组合体有明显的减弱。上述结果表明,AUY-922供应商PCL-Q能恢复辐照处理后SMCs的BKCa正常功能。PCL-Q的保护能力可能来源于其抗氧化、修复质膜和抑制蛋白激酶C的作用。由此可见,这种脂胶囊化的黄酮类化合物——PCL-Q是一种在放射性事故急救和放疗副作用防治方面颇具前景的药物。”
“目的:构建含组氨酸标签的http://www.selleckchem.cn/products/ABT-888.htmlFMS样酪氨酸激酶3配体(Fms-like tyrosine kinase 3 ligand,Flt3L)胞外域蛋白的原核表达载体,并在大肠杆菌中进行表达。方法:依据Flt3L基因序列设计引物,以RT-PCR的方法从小鼠脾脏总RNA中克隆Flt3L基因并构建其胞外域原核表达载体,测序鉴定后在大肠杆菌BL21(DE3)菌株中诱导表达,用免疫印迹鉴定。

3%(19/35)和17.1%(6/35),血清和肿瘤组织EGFR基因突变的一致率为60%(21/35),Ⅲ和Ⅳ期患者血清EGFR基因突变率(35.7%,5/14)显著高于Ⅰ和Ⅱ期患者(4.5%,1/21)。结论

血清游离DNA为监测Ⅲ和Ⅳ期肺癌患者原发肿瘤中EGFR基因突变提供了新的来源。Scorpions ARMS是检测血清游离DNA和原发肿瘤组织中EGFR基因突变的可靠有效方法。磁珠法是是提取血清DNA的有效方法。
肝细胞生长因子受体(hepatocyte growth factor receptor, HGFR),又称c-Met (mesenchymal-epithelial Selleck transition, MET),是在80年代发现的原癌基因产物,现已确定为受体酪氨酸激酶家族中的成员。HGF最初是作为大鼠肝细胞丝裂原(mitogen)而被发现,其作用与扩散因子(scatter factor)相似。现已证明,HGF主要由基质细胞产生,通过其受体c-Met,能刺激上皮细胞等细胞的增殖,运动,形态发生(morphogenesis)和血管生成。 在正常生理情况下,HGF与受体c-Met结合导致受体激酶区的酪氨酸发生磷酸化,进而导致受体及其下游信号通路的激活,在维持机体器官的发育和组织内环境稳定中发挥重要的作用。然而,HGF异常分泌,c-Met突变,扩增(amplification)以及高表达导致的c-Met通路的异常激活,可引起c-Met受体的持续激活与磷酸化,从而持续不断地激活下游信号通路,导致细胞的异常增殖,诱导正常细胞向癌细胞转化。 有许多方法用来抑制异常的HGF/c-Met信号通路,包括：HGF环状异构体拮抗剂(HGF variant antagonist),HGF抗体拮抗剂(HGF antibody antagonist), c-Met抗体拮抗剂(c-Met antibody antagonist)以及小分子c-Met抑制剂。目前发现的小分子c-Met抑制剂绝大多数都是作用在受体酪氨酸激酶的抑制剂。绝大多数化合物都通过与c-Met受体激酶区ATP口袋(ATP binding site)结合,抑制酪氨酸残基的磷酸化,抑制c-Met通路持续异常激活导致的肿瘤细胞异常增殖和生长。 间变性淋巴瘤激酶(anaplastic lymphoma kinase, ALK)是胰岛素受体酪氨酸激酶家族成员之一。ALK在肿瘤中的异常改变主要是基因移位,异常的移位导致许多ALK融合蛋白(ALK fusion protein)产生,并持续激活ALK,导致肿瘤细胞的异常增殖和生长。同时抑制c-Met和ALK已经证明在胶质母细胞瘤等肿瘤细胞中有协同效应。因此,研究同时作用于c-Met和ALK的双重激酶抑制剂(c-Met/ALK

dual inhibitor)是非常有前景的抗肿瘤药物。美国FDA于2011年批准了c-Met/ALK双重抑制剂克唑替尼(Crizotinib)用于治疗有EML4-ALK融合蛋白形成的非小细胞肺癌患者。 虽然c-Met和ALK的双重激酶抑制剂是非常有前景的抗肿瘤策略,但在文献中报道的此类抑制剂很少,除Crizotinib外,还有一个是Xcovery公司研发的X-396,目前在进行一期临床试验。我们实验室多年来一直开展c-Met抑制剂的研究,本论文是在实验室前期的工作基础上,综合文献报道的结果以及临床上应用c-Met/ALK双重抑制剂克唑替尼(Crizotinib)成功的策略,设计和合成新的作用于c-Met和ALK的化合物,旨在发现新的高活性和高选择性的c-Met/ALK双重抑制剂。

HKI-272供应商 主要的实验方法和实验结果 一.SMU系列螺环化合物的设计与合成以及分子对接模拟 在我们实验室之前有关c-Met抑制剂的研发中,发现了一类螺环化合物是有效的高选择性c-Met抑制剂,这些化合物分子中的螺环片段能很好地适应c-Met的ATP结合口袋,而c-Met/ALK双重抑制剂克唑替尼分子中含有典型的激酶铰链区结合基团,即2-氨基吡啶。据此,我们的设计思路是：将螺环片断与激酶铰链区结合基团2-氨基吡啶片断结合成一个新的化合物,可能同时具有c-Met/ALK的双重阻断作用?因此,我们设计了3-位由带手性取代基的苄氧基取代的2-氨基吡啶化合物SMU-A及SMU-B;考虑到2-氨基吡嗪基与2-氨基吡啶基的相似性,又设计了毗嗪化合物SMU-C及SMU-D。上述四个化合物分子中都具有一个手性基团,化学合成难度高。为了减小化学合成的难度,我们除去3-位取代苄氧基中的手性甲基再设计了非手性化合物SMU-E及SMU-F。 然后,我们对设计的化合物与c-Met激酶晶体结构进行了分子对接模拟,发现这些化合物都能与激酶晶体结构进行对接。6个化合物根据Surflex-Dock程序的打分值依次如下：8.68,8.67,9.11,8.95,6.70和6.91,克唑替尼为8.67。以化合物SMU-B为例,c-Met激酶的ATP口袋能够很好地接纳SMU-B,并与其形成多个包括氢键、π-π堆积作用、范德华力等相互作用。在c-Met激酶晶体结构中,SMU-B能与克唑替尼很好地叠合,除了靠近溶剂区的部分,SMU-B与克唑替尼几乎达到完美的重叠一致。此外,SMU-B也能与ALK激酶晶体结构的ATP口袋很好地对接。由此预测,SMU-B应该具有对c-Met和ALK激酶的双重抑制作用。于是,我们合成了六个SMU系列的螺环化合物拟进行下一步的研究。 时间 二.SMU系列螺环化合物对c-Met和ALK激酶高选择性活性的确认 为了验证上述计算机分子模拟的结果,我们首先检测了化合物对细胞中c-Met激酶活性的影响。结果发现,六个化合物对MKN45胃癌细胞中c-Met激酶有显著抑制活性,IC50值依次为0.020,0.019,0.023,0.012,>10和9.0μM,克唑替尼为0.020gM,与计算机分子对接模拟的预测一致。进一步对上述化合物的生物利用度研究结果表明,SMU-B的口服生物度达到48%,因此确定该化合物进入下一步研究。 首先采用美国KINOMEscanTM公司的激酶高通量筛选技术,评价了SMU-B对人96种蛋白激酶生化活性的影响,发现SMU-B在100nM浓度下仅对c-Met,ALK和AXL三种受体酪氨酸激酶活性有显著的抑制活性,抑制率分别为94.4%,91.2%和95.

结果TPK抑制剂预处理后,牵张应力激活ERK的作用被明显阻断,与单纯张力组相比差异有统计学意义(P<0.01);而压缩应力的诱导作用未受影响(P>0.05);低剂量的细胞松弛素D处理后,压应力的诱导作用被明显阻断,ERK的磷酸化水平甚至低于基态,与单纯压力组相比差异有统计学意义(P<0.01),而牵张应力对ERK的激活仅受到一定程度Selleck的影响,与单纯张应力组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论力学信号可同时激活细胞内的细胞骨架、TPK转导通道,但各自主要激活的部分存在差别,无论是牵张还是压缩,成骨细胞对力学信号的感知和转导都与微丝细胞骨架密切相关,TPK的活化可能是牵张应力引起黏附斑复合物形成后的主要后续反应,压缩应力的主要后续反应与之关系不大EPZ-6438体外。”
“为开发一种新型碳酸酐酶抑制剂,并进一步合成一种检测肿瘤乏氧的PET分子影像探针,以4-氨基甲基苯磺酰胺盐酸盐、三嗪为主要起始原料,通过用2-氟乙醇、乙二醇对三嗪环加以修饰,合成了可能具有高亲和力和选择性的碳酸酐酶抑制剂4-[4-(2-氟基乙氧基)-6-(2-羟基乙氧基)-1,3,5-三嗪-2-氨基]甲基苯磺酰胺Selleck Roxadustat。该化合物含有碳酸酐酶抑制剂所含有的活性基团磺胺,同时含有氟原子和三嗪环,是个很有潜力的碳酸酐酶抑制剂,该化合物的总收率为18.5%,可用于下一步实验中的前期生物学评价和PET分子影像探针放射化学合成的参比化合物。”
“目的应用基因表达谱芯片来检测丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶Raf-1抑制剂对急性髓系白血病(AML)细胞基因表达的影响,试图进一步探讨丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶Raf-1抑制剂抗白血病细胞增殖的机制。