48±0.04，其下游的P38和JNK磷酸化水平也都明显提高。 (2)运用特异性抑制剂使P38和JNK的磷酸化表达降低，达到对照组磷酸化水平，但细胞仍表现为G2／M阻滞，阻滞程度较非抑制剂组明显减弱。 结论：在HepG2细胞中高表达Gadd45γ蛋白可以激活Gadd45γ-P38和Gadd45γ-JNK信号转导通路；Gadd45γ-P38和Gadd45γ-JNK通路参与了Gadd45γ诱导的肝癌细胞G2／M期阻滞。
本课题通过研究一次性有氧运动对KK-AyⅡ型糖尿病小鼠血糖和骨骼肌p38及其相关因素的影响，从p38MAPK信号转导通路的角度探讨运动降低糖尿病血糖水平的可能机制，为运动治疗糖尿病提供科学依据和参考。

以雄性6月龄KK-Ay和C57BL/6J小鼠为研究对象，小鼠按血糖配对后随机分为：糖尿病运动组(KE组)和糖尿病对照组(KC组)；正常运动组(CE组)和正常对照组(CC组)。运动方案如下：跑台坡度为0°，速度为12m·min~(-1)，时间30min。实验后即刻在腹腔麻醉后取血和双侧股四头肌。分别用葡萄糖氧化酶法测定血糖浓度：免疫印迹法检测p38蛋白表达和磷酸化；改良比色法测定血清游离脂肪酸；放射免疫法测定血清胰岛素和肿瘤坏死因子α(TNF-α)。 selleck抑制剂 研究结果表明KK-Ay小鼠体重大于C57BL/6J小鼠，血糖高于C57BL/6J小鼠。一次性有氧运动后正常运动组和糖尿病运动组血糖较自身实验前下降。运动后CE组血清胰岛素浓度比CC组低55％，KE组则较KC组低43％。KC组骨骼肌p38磷酸化水平高于CC组，CE组骨骼肌p38磷酸化水平高于CC组，KE组骨骼肌p38磷酸化水平高于KC组。KC组的血清TNF—α浓度明显高于CC组，KE组血清TNF—α浓度明显低于KC组。KC组血清FFA浓度明显高于CC组，KE组血清FFA浓度明显低于KC组；而CE组血清FFA浓度虽低于CC组，但差异无统计学意义。 结论：KK-AyⅡ型糖尿病小鼠骨骼肌p38磷酸化增加，血清TNF-α和FFA水平上升，p38、TNF-α和FFA交互作用，共同在Ⅱ型糖尿病的发生发展过程中起着非常重要的作用。一次性有氧运动可以有效降低KK-Ay小鼠的血糖及血清胰岛素水平。一次性有氧运动直接激活KK-Ay小鼠骨骼肌p38磷酸化，降低血清TNF-α和FFA水平，并通过p38间接作用于TNF-α、FFA，最终达到降低血糖的效果，这可能是运动降血糖的部分分子机制。
研究背景和目的:

近年来随着经济的发展及人均寿命的延长,我国糖尿病的患病率剧增,糖尿病肾病(DN)引起的终末肾功能衰竭(ESRD)已成为威胁糖尿病患者生命的主要原因之一。早期有效地评估肾功能是及时治疗、延缓肾病进展的基础。 24小时内生肌酐清除率(Ccr)是较早使用在临床的肾功能评估法。此法操作繁琐,患者依从性差,结果重复性欠理想。而核素(~(99m)Tc—DTPA)肾脏动态显像由于经济等原因,无法用于临床筛查。于是产生了基于血肌酐(Scr)的肾小球滤过率的公式计算方程。 公式计算肾小球滤过率(eGFR)在慢性肾功能衰竭患者中逐步得到肯定,但在2型糖尿病(T2DM)人群中的应用证据不多。本研究以~(99m)Tc—DTPA肾动态显像测定肾小球滤过率(GFR)为金标准,评估体表面积标准化Cockcroft—Gault方程(CG公式)、简化MDRD方程(MDRD公式)、MDRD-7公式、Ccr在T2DM及非糖尿病肾病患者(NDM)中的应用价值,为临床简易而准确评估糖尿病患者肾功能提供依据。

研究对象及方法: 1.研究对象 Ceritinib 花费 选择浙江大学医学院附属邵逸夫医院2007年3月—2008年2月内分泌科住院的T2DM 时间 94例,均符合1999年WHO糖尿病诊断及分型标准,临床上初步排除合并DN以外的其他类型肾病,其中男性55例,女性39例,平均年龄56±13岁,平均糖尿病病程6.5±5.9年,41例合并高血压(根据WHO建议高血压诊断标准),占43.6%,48例合并代谢综合征(根据IDF的代谢综合征的全球统一诊断标准),占51.1%。选择同期肾内科住院的非糖尿病慢性肾脏病患者55例作为NDM组(根据美国NKF-K/DOQI关于慢性肾脏病定义),其中男性29例,女性26例,平均年龄50±13岁,23例合并高血压,占41.8%,31例行肾脏穿刺活检,占56.4%。 根据有无合并高血压分别将T2DM及NDM分为高血压组和正常血压组。根据有无合并代谢综合征、低蛋白血症、Scr升高将T2DM分为相应的正常组与异常组。根据尿白蛋白排泄率(UAE)将T2DM按分为正常白蛋白尿组(NAU,UAE＜30mg/24h)、微量白蛋白尿组(MAU,30mg/24h≤UAE＜300mg/24h)和临床蛋白尿组(CAU,UAE≥300mg/24h)。两组患者GFR按美国的NKF-K/DOQI指南分成4期:1期GFR≥90ml/min/1.73m~2;2期60≤GFR＜90ml/min/1.73m~2;3期30≤GFR＜60ml/min/1.73m~2;4期GFR＜30ml/min/1.73m~2。 2.研究方法 2.1一般临床资料采集 记录性别、年龄、病程、吸烟史、饮酒史,测量身高、体重、血压、腹围(NDM未测量腹围),并计算体重指数(BMI)。T2DM入院时指测随机血糖(采用强生稳豪型血糖仪及强生稳豪血糖仪试条)。 2.2实验室化验检查 素食,避免茶、咖啡等有色饮料,避免剧烈运动3天后开始清洁留尿,晨8点排空膀胱后开始留置24h尿,至次日晨8点的尿液均收集于广口瓶中。第一次收集尿液后即滴入甲苯5ml,防止细菌污染,记24小时尿量,收集完毕时采空腹静脉血同步送检,以测Scr、血清白蛋白(ALB)、甘油三脂(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、尿素氮(BUN)、尿肌酐、空腹血糖(FBS)、糖化血红蛋白(HbAlc%)、尿白蛋白(NDM未测后两项)。 2.3 ~(99m)Tc—DTPA肾脏动态显像测定GFR及计算eGFR、Ccr所有患者均接受~(99m)Tc—DTPA肾脏动态显像测定GFR,采用CG公式、MDRD公式、MDRD-7公式计算eGFR,并计算T2DM的Ccr。 3.统计 所有数据用SPSS13.

APN/CD13抑制剂抗HCC侵袭及新血管生成研究 目的：探讨APN/CD13抑制剂24F对HCC细胞侵袭和新血管生成的抑制作用 方法：选用人HCC细胞HuH-7和人脐静脉血管内皮细胞HUVEC,二者均表达APN/CD13。以L-亮氨酸对硝基苯胺为底物测定24F对APN/CD13酶活性的抑制作用。MTT法测定24F对HuH-7细胞增殖的抑制作用。Transwell细胞侵袭实验测定24F对HuH-7细胞侵袭和游走运动能力的抑制作用。微管形成实验测定24F对HUVEC细胞在Matrigel表面形成微管样结构的抑制作用。

BI 2536数据表 结果：化合物24F对APN/CD13酶活性的半数抑制浓度为1.88mM。24F在0-200μg/mL浓度范围内对HuH-7细胞的增殖具有轻微地抑制作用,未观察到该化合物对HuH-7有明显的细胞毒效应。体外细胞侵袭实验结果表明,24F能够减少穿过Matrigel的HuH-7细胞数目,显示其对肿瘤细胞侵袭和游走运动能力的抑制作用。24F能够在体外抑制血管内皮细胞HUVEC形成微管样结构,提示24F具有潜在的抑制肿瘤新血管生成的能力。 结论：APN/CD13抑制剂24F对HCC细胞侵袭和游走运动能力具有抑制作用,对血管内皮细胞HUVEC微管形成具有抑制作用,提示APN/CD13抑制剂在抗HCC侵袭转移及新血管生成方面具有潜在的应用价值。 第二节.APN/CD13抑制剂抗卵巢癌增殖及新血管生成研究 目的：探讨APN/CD13抑制剂LYP对卵巢癌生长增殖及新血管生成的抑制作用。 方法：体外实验选用人卵巢癌细胞株ES-2和SKOV-3以及人脐静脉血管内皮细胞HUVEC。三种细胞均表达APN/CD13,表达水平由高到低依次为ES2、

SKOV-3和HUVEC。MTT实验测定LYP对细胞增殖的抑制作用。台盼蓝实验检测LYP的细胞毒效应。以L-亮氨酸对硝基苯胺为底物测定LYP对APN/CD13酶活性的抑制作用。流式细胞术和Western blot实验分别测定LYP对细胞APN/CD13表达水平的影响。划痕实验和Transwell侵袭实验观察LYP对HUVEC细胞侵袭和游走运动能力的抑制作用。微管形成实验测定LYP对HUVEC细胞在Matrigel表面形成微管结构的抑制作用。裸鼠接种ES-2细胞后尾静脉给予LYP治疗两周,观察药物对ES-2肿瘤生长的抑制作用和裸鼠对给药方案的耐受性。CD34免疫组化实验测定LYP对ES-2肿瘤组织平均血管密度和平均血管直径的影响。Western blot实验测定LYP对肿瘤组织内APN/CD13、VEGF、bFGF和TGFa表达水平的影响。 结果：MTT实验结果表明LYP能够有效的抑制ES-2细胞的增殖。LYP对ES-2细胞APN/CD13酶的活性具有显著的抑制作用。相同浓度下,LYP对APN/CD13酶活性的抑制作用大于乌苯美司。相对于ES-2细胞,LYP对SKOV-3细胞增殖的抑制作用较弱,提示LYP对ES-2细胞增殖的抑制作用可能与抑制APN/CD13有关。流式细胞术实验和Western blot实验表明LYP能够降低体外培养ES-2细胞APN/CD13的表达水平。裸鼠接种ES-2细胞后尾静脉给予LYP,连续治疗两周,ES-2肿瘤的生长受到显著的抑制作用。Western blot实验结果显示LYP能够降低肿瘤组织APN/CD13的含量。与阳性对照药乌苯美司相比,LYP对ES-2肿瘤生长的抑制作用较强。裸鼠对给药方案的耐受性良好,给药组裸鼠的体重与阴性对照组比较没有显著性差异。 为进一步研究LYP抑制体内ES-2肿瘤生长作用背后的机制,我们检测了LYP在抑制新血管生成方面的药理活性。MTT实验和台盼蓝实验结果显示在5-80μM浓度范围内,LYP对HUVEC细胞没有明显的细胞毒效应。在该浓度范围内LYP对HUVEC细胞APN/CD13酶的活性有一定的抑制作用。Transwell侵袭实验和划痕实验结果显示LYP能够明显抑制HUVEC细胞的侵袭和游走运动能力。微管形成实验表明LYP对HUVEC细胞在Matrigel表面形成微管样结构具有抑制作用。LYP对新血管生成的抑制作用在体内实验中得到了验证。对ES-2肿瘤组织进行CD34免疫染色,结果发现LYP给药组肿瘤平均血管密度和平均血管直径均小于阴性对照组。在相同给药剂量下,LYP抑制新血管生成的作用大于阳性对照药乌苯美司。LYP的抗微血管生成作用可能与其抑制与血管生成有关的分子的表达有关。Western

Akt抑制剂 blot实验结果显示,LYP给药组肿瘤组织内VEGF、bFGF和TGF-a的水平显著低于阴性对照组。 结论：LYP在体外和体内对卵巢癌细胞生长增殖具有较强的抑制作用,该作用可能与其降低细胞APN/CD13表达水平和抑制新血管生成有关。
目的：检测表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor, EGFR)、分化型胚胎软骨表达基因1(differentiated embryo-chondrocyte expressed gene1,DEC1)、分化型胚胎软骨表达基因2(differentiated BI 6727分子量 embryo-chondrocyte expressed gene2, DEC2)、低氧诱导因子1a(Hypoxia-inducible factorla,HIF1a)、信号转导及转录激活因子3(signal transducer and activator of transcripton3, STAT3)及血管内皮生长因子(vascular endothelia growth factor,VEGF)信号传导分子在癌和癌旁组织的表达,探讨信号分子各自表达和不同表达模式与临床特征的关系及不同信号传导分子之间的关联。 材料与方法：选取了75例肺腺癌病人,标本收集时未进行任何治疗。病人年龄37-84岁,中位年龄为61岁；男性41例,女性34例；肿瘤直径≤3cm20例,>3cm55例；无淋巴结转移35例,有淋巴结转移的40例；有远处转移的5例,无远处转移的70例；高分化4例,中分化33例,低分化38例；TNMl期9例,TNM2期46例,TNM3-4期20例。采用免疫组织化学技术进行EGFR、DEC1、DEC2、HIF1α、STAT3及VEGF蛋白表达的检测,不同分子表达的阳性判定采用相应的评分标准；应用SPSS11.

By using a combined method of density functional theory(DFT), molecular mechanics(MM2) and statistics for two-dimensional(2D), as well as the comparative molecular field analysis(Co MFA) and comparative molecular similarity index analysis(Co MSIA) methods for three-dimensional(3D), theoretical studies on 2D/3D quantitative structure-activity relationships(QSAR) of 22 novel compounds of [1,2,4]triazolo[1,5-a] pyridinylpyridines acting as PI3 K inhibitors

against the human colon carcinoma cell line(HCT-116) AUY-922 have been performed. Both the 2D- and 3D-QSAR models established from the random 18 compounds in training set show significant statistical quality

and satisfactory predictive ability(R2 = 0.821, q2 = 0.773 for 2D-QSAR, R2 = 0.966, q2 = 0.668 for Co MFA, R2 = 0.979, q2 = 0.753 for Co MSIA). The combined 2D- and 3D-QSAR studies suggest that the moderate-size, hydrophilic and electron-withdrawing group at R1 position, the bulky and hydrophobic group at R2 position, and the minor, hydrophobic, H-bond donor and electron-donating group at R3 position would enhance the anticancer activities. These obtained results help to insight into the action mechanism, and will serve BMS-754807 花费 as a basis for the design of new potent anticancer agents.
表皮生长因子受体(EGFR)基因突变的非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)是一类具有独特病理和临床特征的恶性肿瘤。目前由于针对EGFR基因突变阳性NSCLC治疗中TKIs的应用,患者的生存期已超过三年,所以此类患者从诊断到治疗应进行全程管理。首先要进行分子检测,发现EGFR基因突变NSCLC,以避免失去EGFR-TKIs的治疗机会。研究证明,EGFR基因突变NSCLC任何线接受第一代抑制剂治疗,患者疗效及生存获益且耐受性良好。一代EGFR-TKIs耐药后根据失败模式选择后续局部或全身治疗,或根据耐药失败分子机制给予新的分子靶向治疗。对EGFR基因突变NSCLC应实施科学、有序的全程管理。
目的:观察佐剂关节炎大鼠滑膜PTEN/PI3K/AKT通路及缺氧诱导因子(HIF-1α)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达,探讨类风湿关节炎血管新生的机制。方法:30只大鼠随机分成正常对照组和模型对照组,模型对照组采用弗氏完全佐剂建立佐剂关节炎大鼠模型。造模成功后第19天,采用酶联免疫吸附法检测大鼠HIF-1α、VEGF、微血管密度(MVD)的表达,采用Western Olaparib分子量 Blotting检测滑膜PTEN、PI3K、AKT蛋白表达。结果:与正常对照组比较,模型对照组大鼠足跖肿胀度、关节炎指数升高,血清MVD、VEGF、HIF-1α表达及滑膜PI3K、AKT升高,PTEN降低。相关性分析显示,PI3K、HIF-1α与MVD呈正相关,VEGF、AKT与足趾肿胀度呈正相关,PTEN与关节炎指数呈负相关。HIF-1α与VEGF呈正相关,PI3K与AKT呈正相关,PTEN与PI3K、AKT、VEGF呈负相关。结论:佐剂关节炎大鼠滑膜PTEN/PI3K/AKT通路表达失调是引起滑膜血管新生的机制之一。
The

phosphatidylinositol 3 kinase(PI3K) pathway is frequently altered in cancer, including ovarian cancer(OC). Unfortunately, despite a sound biological rationale and encouraging activity in preclinical models, trials of first-generation inhibitors of mammalian target of rapamycin(m TOR) in OC have demonstrated negative results. The lack of patient selection as well as resistance to selective m TOR complex-1(m TORC1) inhibitors could explain the disappointing results thus far. Nonetheless, a number of novel agents are being investigated, including dual m TORC1/m TORC2, Akt, and PI3 K inhibitors.

1SpostC组～10SpostC组):再灌注前5 min分别静脉负荷注射舒芬太尼0.1,0.3,1,3,10μg/kg,5 min后再灌注120 min。再灌注120 min时取心室肌组织,经2,3,5-三苯四氮唑(TTC)染色计算心肌梗死面积(IS)与缺血危险区(AAR)比值(IS/AAR)。于结扎线缝好后平衡30

min(T_0)、缺血30 min末(T_1)、后处理末(T_2)、再灌注120 min末(T_3)记录平均动脉压(MAP)、心率(HR),并计算心率收缩压乘积(RPP)。于T_3时取颈动脉血2 ml待生化指标监测,初步探讨缺血后处理和舒芬太尼后处理对再灌注后心肌组织的脂质过氧化反应的影响:选取最佳剂量舒芬太尼后处理组、Sham组、CON组、IpostC组,采用硫代巴比妥酸(TBA)法测定丙二醛(MDA)浓度,黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶(SOD)活性。 MS-275数据表 结果血流动力学:各组T0时MAP、HR、RPP之间比较差异无统计学意义(P > 0.05);与Sham组比较,CON组、3SpostC组、10SpostC组MAP降低,CON组、IpostC组、10SpostC组HR降低,除0.3SpostC组和1SpostC组外,其余各组RPP均降低(P < 0.05);与CON组比较,10SpostC组HR、RPP降低,1SpostC组RPP升高(P < 0.05);与T_0比较,CON组、IpostC组、3SpostC组、10SpostC组MAP和RPP降低,CON组和10SpostC组HR降低(P < 0.05)。心肌梗死面积:各组左心室与右心室(LV+RV)体积之和、AAR/(LV+RV)比较差异无统计学意义(P > 0.05),与CON组比较,IpostC组、0.3,1,3,10SpostC组IS/AAR降低(P < 0.05),其中舒芬太尼后处理组中1SpostC组降低最为明显。与IpostC组比较,0.1SpostC组IS/AAR增加(P < 0.05)。舒芬太尼剂量-效应关系Sigmoidal方程为:Y=0.3749+0.4872/(1+101.502-X),半数有效量(ED50)为0.03174μg/kg。血生化指标:根据心肌梗死面积结果,选取1μg/kg组为最佳剂量舒芬太尼后处理组。与Sham组比较,其余3组血清MDA浓度升高,SOD活性降低(P

一般 < 0.05);与CON组比较,IpostC、1SpostC组MDA浓度降低,SOD活性升高(P < 0.05)。 结论舒芬太尼可模拟缺血后处理减轻在体大鼠心肌缺血再灌注损伤,并且呈剂量依赖性,1μg/kg舒芬太尼心肌保护作用最佳。其可能通过抑制再灌注后心肌组织的脂质过氧化反应,减少再灌注时氧自由基的大量产生,从而产生心肌保护作用。
目的：研究大鼠脊髓损伤(SCI)后Wnt-3a信号蛋白的表达及其对脊髓神经干细胞增殖的影响。方法：选用30只SD成年雌性大鼠,随机分为正常对照组(A组,n=5)和损伤组(B组,n=25)。A组不损伤脊髓,B组在大鼠T9-T10段采用Allen打击法(25g·cm)造成脊髓损伤,于造模后1d,3d,7d,14d,28d进行取材。对距离损伤中心5mm的脊髓进行免疫组织化学染色,检测Wnt-3a蛋白表达的动态变化及内源性神经干细胞的增殖,与A组比较,并统计分析两者之间的相关性。结果：A组大鼠的脊髓中央管周围和外周软膜仅有极少量的Wnt-3a蛋白的表达,而BrdU阳性细胞也并不明显,白质中几乎没有。B组大鼠损伤1d后在脊髓中央管周围和外周软膜就有BrdU阳性细胞和Wnt-3a蛋白的表达,3d后表达明显增多,7d后达到高峰,14d后逐渐下降,28天后仅有少量表达。用统计软件分析Wnt-3a蛋白的表达与Brdu的表达具有相关性。结论：大鼠脊髓损伤后Wnt-3a蛋白表达增多,促进内源性神经干细胞的增殖。
目的

那个 研究氯化锂抑制GSK-3β活性后,生长抑素类似物奥曲肽对结肠癌SW480细胞Wnt/β-Catenin信号传导通路抑制作用的变化,以进一步明确GSK-3β在生长抑素抑制Wnt/β-Catenin通路中的作用。阐明生长抑素的抗肿瘤机制,为寻找具有开发前景的Wnt信号通路候选药物提供实验和理论依据。 方法 以SW480细胞为实验对象,设置对照组、奥曲肽低浓度组(10~(-10)M)、奥曲肽高浓度组(10~(-6)M)、LiCl组、奥曲肽低浓度+LiCl组(10~(-10)M+20mM)、奥曲肽高浓度+LiCl组(10~(-6)M+20mM),共六个组,分别定为A、B、C、D、E、F组。 Western blot方法测定各组细胞Wnt/β-Catenin信号传导通路中关键因子β-Catenin、pβ-Catenin及下游靶基因C-myc、CyclinD1蛋白表达,以明确奥曲肽是否通过上调GSK-3β蛋白的活性,从而抑制该信号通路的作用。 结果 1.奥曲肽(10~(-6)、10~(-10)M)对SW480细胞β-Catenin, c-myc, cyclin D1蛋白表达有明显抑制作用,对pβ-Catenin蛋白表达有明显上调作用,与对照组比较差异有显著性(P0.05)。 3.与单用奥曲肽(10~(-6)M、10~(-10)M)相比,奥曲肽高浓度+LiCl组及奥低浓度曲肽+LiCl组SW480细胞中的c-myc, cyclin D1蛋白表达上调,差异有显著性(P0.05)。提示LiCl抑制了奥曲肽对Wnt/β-Catenin信号传导通路的作用。 结论 1.