瘤内注射pcDNA3.1-IGFBP7可明显遏制的肿瘤生长,与对照组相比差异具显著性(F=256.1,P<0.0014)。免疫印迹检测IGFBP7的表达,结果示pcDNA3.1-IGFBP7组瘤内注射转染pcDNA3.1-IGFBP7后可明显增加IGFBP7的表达,而pcDNA3.1-CONTROL与B16-F10组中IGFBP7的表达较低且程度一致,三组β-actin的表达selleck激酶抑制剂量无明显区别；表明pcDNA3.1-IGFBP7可特异性促进IGFBP7的表达,pcDNA3.1空质粒不能促进IGFBP7的表达且对β-actin的表达无影响。pcDNA3.1-IGFBP7与pcDNA3.1-CONTROL转染率相同,大约为50%；免疫组织化学检测结果提示pcDNA3.1-IGFBP7组中IGFBP7表达明显高于pcDNA3.1-C很少ONTROL与B16-F1O组(P0.05).VEGF在pcDNA3.1-IGFBP7组中的表达明显较pcDNA3.1-CONTROL组及无注射质粒组者低(P
目的:证实EGFR在胃癌组织中的表达强度与胃癌进展存在联系,构建人EGFR显性负性突变体真核表达载体pEGFPN1-DNEGFR,并进行鉴定,瞬时转染COS-7细胞后检测DNEGFR-EGF一般P蛋白表达及进行亚细胞结构定位;稳定转染人胃癌细胞株,探讨DNEGFR-EGFP负调控EGFR功能的机制,以及检测其对胃癌细胞恶性表型的作用,并明确分子机制。 方法: (1)应用免疫组织化学PV法,检测60例胃癌组织中EGFR的表达情况,并且分析其与临床病理特征的关系。 (2)将RT-PCR方法扩增得到的编码EGFR信号肽段、胞外区和跨膜区的cDNA,定向克隆至空载体pEGFP-N1中,构建真核表达载体pEGFPN1-DNEGFR。

降解实验表明AURKA过表达可以延缓E2F1依赖于蛋白酶体的泛素化降解,促进E2F1的累积。随后,我们还发现AURKA的过表达可以诱导microRNA-17-92的表达上调,而这种作用至少部分依赖于E2F1。 为了研究AURKA导致的耐药性问题,我们建立了AURKA稳转食管癌细胞系,发现AURKA高表达可促进抗凋亡活性；利用一种凋亡芯片筛选KPT-330 价格得到了具有抗凋亡效应的基因PAK7,并且发现AURKA通过E2F1诱导PAK7的表达,敲降PAK7可部分逆转AURKA的抗凋亡活性。对PAK7的进一步深入研究发现PAK7在食管癌细胞系和组织标本中高表达,临床参数分析显示PAK7与食管癌的淋巴结转移和肿瘤分期存在正相关关系,并且PAK7高表达可促进食管癌细胞的迁移能Dolutegravir订单力,转化NIH3T3细胞,使其在免疫缺陷的裸鼠中形成肿瘤,提示PAK7可能是一个潜在的候选癌基因。 为了更全面地了解AURKA过表达后E2F1的转录调节,我们用ChlP-chip的方法检测了全基因组水平E2F1结合启动子的状况。应用两种不同的分析工具,对E2F1转录调节的动态变化进行分析后发现：在AURKA高表达0点击此处-24小时期间,E2F1下游靶基因主要富集于EGF等信号通路,而在24-48小时,E2F1下游靶基因主要富集于VEGF、wnt/β-catenin等信号通路,从48小时内整体变化来看,启动子与E2F1结合的基因主要集中于肿瘤发生发展相关的信号通路以及TGF-p通路等,提示AURKA高表达可能通过E2F1对细胞周期进展具有促进作用。 总之,AURKA是一个在肿瘤发生发展中起多重作用的关键癌基因。

治疗前后观察患者第二至四腰椎椎体和股骨颈的骨密度(Bone mineral density, BMD)、骨矿含量(Bone mineral content, BMC),血液指标：血钙(Calcium, Ca)、血磷(Phosphorus, P)、碱性磷酸酶(AlkMEK抑制剂alin phosphatase, ALP)、甲状旁腺激素(Parathyroid Hormone, PTH)、降钙素(Calcitionin, CT)、血清抗洒石酸酸性磷酸酶(Tartrate-resistant acid phosph以及atase 5b, TRAP-5b)和血清25羟基维生素D (25-hydroxyvitamin D,1,25-(OH)2D3)。课题研究周期为一年,分别于课题开始和结束时测定观察指标。课题研究期间定期对患者进行电话随访,督促其参加运动并无按时服药,及时解决其在课题研究过程中遇到的相关问题,尽量减少病例脱落。结果①骨密度值变化：治疗后两组腰椎、股骨颈BMD、BMC均有增高,但治疗组差异有统计学意义(P0.05)。两组间比较,治疗后治疗组腰椎BMD、BMC、股骨颈BMD均较对照组升高,有显著差异(P<0.05),治疗组股骨颈BMC与对照组差异无统计学意义。

SB可能是通过降低骨髓细胞ROS水平,提高造血系统功能来实现辐射保护作用,具体作用机制仍需进一步深入研究。
水飞蓟素（Silymarin）是从水飞蓟的种子中提取出来的一种黄酮木质素类混合物，它包括水飞蓟宾（Silibinin，或Sylibin）、异水飞蓟宾（isosy查找更多libinin）、水飞蓟亭（silicristin）、水飞蓟宁（silidianin）等成分。水飞蓟宾本身也是由等比例水飞蓟宾A和水飞蓟宾B构成的两个非对映体混合物，体外和动物研究认为其有很好的保护肝细胞免受毒素损伤的护肝作用，被称为“天然的保也许肝药”。在动物研究实验中没有明显的慢性毒副作用。近些年来的研究发现，水飞蓟宾还具有较强的抗肿瘤活性，其抗肿瘤作用和分子机制研究都取得了较大进展。体外研究表明，对于雄性激素依赖型和非依赖型前列腺癌、皮肤癌、膀胱癌、肺癌、结肠癌、乳腺癌、卵巢癌、肾也许癌、肝癌、宫颈癌和舌癌均具有抑制作用。 本研究的主要目的是探讨水飞蓟宾在宫颈癌及胃癌中的功能及其抑制肿瘤细胞增殖的机制。首先，我们以宫颈癌作为研究模型，流式细胞术的检测结果显示水飞蓟宾使宫颈癌HeLa细胞阻滞在G2/M期。用200μM的水飞蓟宾处理HeLa细胞24h后，G2/M期的细胞比例由对照组的5.64%增至22.67%。

应用FISH技术检测肺鳞状细胞癌组织和癌旁正常肺组织FGFR1基因扩增情况；本次研究采用FGFR1基因扩增标准为：FGFR1/CEN8信号比值≥2.0,或每个细胞核中FGFR1信号数≥6。应用SPSS19.0统计软件对实验结果进行统计学分析,将患者的临床资料、病理学特征及实验结果共同建立数据库,计数资料采用X2检验或Fisher’s精确概率检验；计量资料用均Protein Tyrosine激酶抑制剂数±标准差表示,两组均数比较时采用独立样本t检验(方差齐时)或t’检验(方差不齐时)；多组计量资料均数之间的比较采用方差分析(F检验),如果差别有统计学意义,则行SNK检验法进行组间两两比较。以P0.05)。将患者年龄以60岁为界分为2组,2组间FGFR1基因扩增无显著性差异(P>0.05);FGFR1扩增组与非扩增组的中位肿瘤直径为什么均为4cm,无显著性差异(P>0.05); FGFR1基因扩增在T分期各组之间无显著性差异(P>0.05)；在NO、N1、N2组之间,FGFR1扩增无显著性差异(P>0.05)；在pTNM各期患者之间,FGFR1扩增无显著性差异(P>0.05);在不同吸烟状态的患者之间,FGFR1扩增存在显著差异(P0.05)。将患者年龄以60岁为时间界分为2组,2组间FGFR1基因扩增无显著性差异(P>0.05)；FGFR1基因扩增在T分期各组之间无显著性差异(P>0.05)；在N1、N2、N3组之间,FGFR1扩增无显著性差异(P>0.05),但在NO组与Nx(x=1,2,3)组之间,FGFR1存在显著性差异(P0.05)；在不同吸烟状态的患者之间,FGFR1扩增无显著差异(P>0.05)；不同饮酒史的患者之间,FGFR1扩增无显著差异(P>0.05)。

本课题建立了体外PARP-1的活性测定方法和细胞水平PARPs的活性测定方法，选用一株对PARP抑制剂敏感的细胞应用于体内外的肿瘤抑制实验，建立了一套灵活稳定的寻找和发现具有抗肿瘤活性的PARP抑制剂的方法。
目的：初步探讨精氨酸特异性单腺苷二磷酸核糖基化转移酶（ART1）与聚腺苷二磷酸核糖基化聚合酶（PARP-1）在CDDP诱导的小鼠结肠癌CGefitinib小白鼠T26细胞凋亡中的协同作用及其机制。 方法：以携带ART1-cDNA的慢病毒感染小鼠结肠癌CT26细胞，以ART1-shRNA CT26细胞、un-transfected CT26细胞以及LV-controlCT26细胞为对照。采用顺铂（CDDP）作为凋亡诱导剂。采用RT-PCR、Westren Blot方法检测ART1Epigenetics抑制剂mRNA和ART1蛋白表达；采用流式细胞术、Hochest33342检测各组CT26细胞的凋亡率；Western Blot方法检测RhoA、ROCK1、NF-κB、Cox-2、Caspase3、PARP1以及PARP1裂解片段的表达。 结果： 1.ART1-cDNA慢病毒成功转染CT26细胞，RT-PCR以及Westerselleck化学nBlot检测结果显示：与ART1-shRNA CT26细胞、LV-control CT26细胞以及untransfected CT26细胞相比，ART1-cDNACT26细胞中ART1表达水平显著增高(P
目的：乙酰肝素酶（heparanase, HPA）作为唯一一种内源性D-葡萄糖醛酸内切酶，能够降解硫酸乙酰肝素蛋白聚糖(heparan sulfate proteoglycan, HSPG)。

结肠癌转移相关基因一1(Metastasis-associated in colon cancer-1,MACC1)是HGF/c-Met(Hepatocyte growth factor/Met tyrosine kinase receptor)信号通路活化的重要调节因子。我们前期研究表明MACC1高表达预示GC患者较差的临床预后,同时,我们发现MACC1通过HGF/c-MetEverolimus信号通路促进GC细胞增殖,并通过上皮间质转化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)促进GC细胞侵袭和迁移。既往研究表明EMT可促进肿瘤进展,参与VM进程。HGF诱导MACC1核转位发挥生物学功能。因此我们假设 MACC1可能在GC的VM形成中发挥重要作用。已知EMT调控蛋白主要包括TWIST1和TWIST2。TW寻找更多IST1可诱导EMT的发生,同时促进肝细胞癌的VM形成。TWIST2作为bHLH(basic helix-loop-helix)转录家族成员,与TWIST1具有90%序列同源性。TWIST2参与多种肿瘤的EMT发生,提示TWIST2也可能在VM形成中发挥重要作用,但关于TWIST2是否参与VM形成尚不清楚。我们假设MACC1通过核转位活化TWIST1/有2信号通路促进GC的VM进程。VE-cadherin是最早发现的VM形成相关蛋白,其属于内皮细胞的黏附分子,具有激酶活性。有研究报道,沉默VE-cadherin可明显抑制VM条索样结构。E-cadherin是上皮细胞重要表型之一,其表达缺失被认为是EMT发生的重要标志。我们前期研究证实了MACC1下调E-cadherin表达。Sun等研究也证实TWIST1通过上调VE-cadherin表达,下调E-cadherin促进肝癌VM发生。

K系列目标化合物以取代苯乙腈为原料,经成哌啶环反应、腈水解反应、与中间体C的酸胺缩合反应,脱Boc保护反应所得。本实验中我们共合成38个化合物,其中E系列化合物23个,K系列化合物15个,并通过核磁氢谱、碳谱或质谱确证结构。经文献查阅和Scifinder结构查询,所合成化合物为新化合物。活性结果表明,E系列目标一般化合物均具有一定的Akt1激酶抑制活性和PC-3细胞、LNCaP细胞生长抑制活性,其中化合物E-19对Akt1激酶的IC50为18 nM,对PC-3细胞的半数生长抑制浓度为21 uM。K系列目标化合物相比E系列目标化合物,对Akt1激酶的抑制活性和对PC-3细胞的生长抑制活性均有较大程selleck产品度的提高,其中化合物K-9、K-13对Akt1的抑制率(40nM)分别为91%、94%,对PC-3细胞的半数生长抑制浓度分别为6 uM、26 uM,活性要好于阳性药GSK690693。利用Sybyl进行对接研究分析,K系列化合物中的哌啶环结构能够进入Akt激酶Acid hole部位与G还有lu234氨基酸形成氢键作用,而E系列化合物没有与Acid hole部位形成氢键作用,这可能是K系列化合物活性要优于E系列化合物的原因。在以后的工作中,我们将对活性较好的化合物进行激酶选择性检测,并进一步结构优化,为筛选抗肿瘤药物奠定基础。
背景及意义癌症是严重威胁人类健康的恶性疾病之一。在所有癌症中,肺癌是男性死亡人数最多、女性死亡人数高居第二位的恶性肿瘤。

说明Velcade克服Namalwa细胞株对阿霉素的耐药部分通过下调IRF4表达起作用。 结论： 1、IRF4在半数以上DLBCL中表达，其表达者预后较不表达者差，可以作为DLBCL的不良预后指标。 2、体外细胞株研究发现IRF4转录因子与DLBCL传统化疗耐药相关。 3、蛋白酶体抑制剂Velcade增强阿霉素对Namalwa细胞的生长抑制及促凋亡作用，可能通过下调I不RF4的表达逆转了其对阿霉素的耐药； 4、IRF4可能成为DLBCL治疗的新靶点。
认识肿瘤微环境对肿瘤细胞侵袭转移和耐药等特性的影响,可为肿瘤的治疗提供理论和实验依据。目前,对于认识肿瘤微环境有以下两个研究热点：一、胞外基质分子与水凝胶材料复合用于模拟肿瘤微环境的研究。其中,海藻酸钙水凝胶的理化性能与细胞外基质的理化性能十分相近,而且制备PI3K抑制剂过程可在生理条件下进行,是肿瘤细胞体外三维培养的理想基质材料。二、胞外基质分子的纳米构建用于模拟肿瘤微环境的研究。实验表明纳米材料的结构和形貌可以影响肿瘤细胞的粘附、生长、迁移和分化等行为。硫酸软骨素(CS)是多种肿瘤胞外基质的重要成分,对肿瘤生物学行为起着重要的调节作用。因此,论文结合本实验室在海藻酸钙(ALG)水凝胶方面的研究基础,开展了点击此处CS修饰ALG水凝胶、制备ALG/CS凝胶微球以及用CS制备纳米粒子的研究,并作为模拟肿瘤微环境的研究工具,考察对肿瘤细胞生长、转移、耐药和干性等生物学特性的影响。主要研究结果如下：(1)建立了CS修饰海藻酸钙凝胶微球的制备方法,考察了微球的形态、粒径、机械强度和通透性等基本特性及其控制条件。成功构建了机械强度和通透性较高的ALG/CS凝胶微球。(2)考察了ALG/CS凝胶微球制备过程与细胞培养条件下的稳定性及其影响机制。

2%MPTP溶液,剂量为20mg/(kg·d),连续注射5d,建立PD模型,并进行相应治疗。动物存活期为28d。 主要实验结果如下： 1.针刺舞蹈震颤控制区对PD模型小鼠行为学的影响 腹腔注射MPTP后,小鼠出现不同程度的肢体震颤,竖毛竖尾急性反应。造模5天后小鼠出现体重减轻、毛色暗淡、行动迟缓等表现,爬杆时间延长。对爬杆时间进行评分,与正常组相比,模型组计分比正常组明显减少(P<0.05),三个治疗组较模型组均有明显增加(P<0.05),但针刺组和针美组的数量较模型组和美多巴组增加,其中针美组的数量较美多巴组显著增加(P<0.05)；而针美组表达比模型组明显增加(P<0.05)；针刺组、针美组表达比模型组明显升高(P<0.05)；针刺组表达比美多巴组表达明显升高(P<0.05)；针美组表达比针刺组明显降低(P<0.05),针刺组CA1-CA4区比正常组、模型组和美多巴组的表达有明显升高(P<0.05)；针美组的CA1和CA2区的表达较模型组明显升高(P<0.05),其中美多巴组的表达最低,但针刺组的表达与正常组无明显差别；针刺组及针美组与美多巴组比较,表达量明显上升(P<0.05)；针美组在CA1、CA3和CA4区的表达比模型组和美多巴组明显升高(P<0.05)；针美组在CA1和CA4的表达比针刺组有明显上升(P
目的：癫痫是神经系统中一种常见的综合征，可发生于各个年龄阶段的人群，流行病学调查显示：全世界大约有5000万癫痫患者，我国的癫痫患病率为3.5‰-4.8‰。癫痫具有反复发作的特点，其病理生理基础是脑部神经元高度同步化异常放电导致正常的生理功能紊乱。短暂的反复发作或者一次持续发作均可导致严重的神经元凋亡,尤其是海马等边缘系统的神经元凋亡更为明显。研究表明，神经元凋亡和神经胶质细胞增多能够促使海马硬化，海马硬化导致癫痫频繁发作甚至形成难治性癫痫。因此，深入研究癫痫发作后神经元凋亡的分子机制，探索新型有效的抗神经元凋亡的药物具有深远的意义。

一般 本实验以杏仁核电点燃的慢性癫痫大鼠模型作为研究对象，以α-硫辛酸（α-lipoic acid,α-LA）作为干预剂。分别检测大鼠点燃前后的后发放阈值（ADT)，达到每个发作等级所需的累积刺激数及累积后发放持续时间(ADD)，应用Western Blot方法检测p38MAPK及p-p38MAPK在海马组织中的表达情况，应用流式细胞分析碘化丙啶(Propidium Iodide,PI)染色技术检测海马神经元凋亡率。从而研究α-LA对杏仁核电点燃癫痫大鼠的行为及海马p38MAPK表达的影响，并初步探讨α-LA对杏仁核电点燃致痫大鼠的脑保护作用及分子机制。 还有 方法：选用雄性健康清洁的Wistar大鼠36只，体重在250-300g之间。随机分为正常对照组:不予以任何处理；α-LA组：每天给予α-LA（40mg/kg）腹腔注射一次；假手术组：杏仁核植入电极后不予以任何处理；电刺激模型组：植入电极后每天给予120%的点燃前ADT刺激一次；电刺激+α-LA低剂量组：植入电极后每天给予α-LA （20mg/kg）腹腔注射30min后以120%的点燃前ADT刺激一次；电刺激+α-LA高剂量组：植入电极后每天给予α-LA Tariquidar溶解度 （40mg/kg）腹腔注射30min后以120%的点燃前ADT刺激一次，连续刺激15天，每组6只大鼠。依据Racine六级评价标准观察大鼠的行为学表现，记录大鼠每天的发作等级及ADD。造模结束后对大鼠采用断头取脑并快速分离海马组织，用Western

Blot方法检测p38MAPK及p-p38MAPK的表达水平，并用流式细胞术PI染色技术检测海马神经元凋亡率。 结果： 1.行为学观察①达到第一次Ⅴ级发作所需的累积电刺激数：与模型组（10.17±0.31）相比，电刺激+α-LA高剂量组（11.50±0.43）明显增多（P0.05)。②达到第一次Ⅴ级发作所需的累积ADD：与模型组（235.83±5.00）相比，电刺激+α-LA低剂量组（191.17±5.82）和电刺激+α-LA高剂量组（184.83±7.60）明显缩短（P0.05）。③点燃前后的ADT：模型组点燃后的ADT（133.33±12.29）较点燃前（273.33±24.59）明显降低（P<0.05）；电刺激+α-LA高剂量组点燃后的ADT（200.00±17.13）较点燃前（286.67±22.31）明显降低（P<0.05）；电刺激+α-LA低剂量组点燃后ADT（153.33±19.78）较点燃前（280.00±30.55）明显降低（P<0.05）。④点燃后ADT：与模型组相比，电刺激+α-LA高剂量组明显增高（P0.05）。假手术组、正常对照组、α-LA组大鼠均无癫痫发作。 2.Western Blot检测结果假手术组、正常对照组、α-LA组的海马组织内p-p38MAPK表达水平分别为0.55±0.06、0.62±0.05、0.64±0.05，差异无统计学意义（P>0.05）。与电刺激+α-LA低剂量组(2.20±0.04)和电刺激+α-LA高剂量组(1.26±0.93)相比，模型组海马p-p38MAPK表达水平(3.39±0.