上皮性卵巢癌患者血清HGF各临床分期之间分别比较,P<0.05,差异有显著性。2.上皮性卵巢癌患者血清HGF各病理分级之间分别比较,P<0.05,差异有显著性。3.HGF和CA125对卵巢癌诊断敏感率分别为90%和60%,而二者联合检测敏感率可达95%,与单独检测相比较,P<0.05,差异有显著性。6.上皮性卵巢癌组织细胞胞浆中HGF各病理分期之间分别比较,P
食管癌是一种高侵袭性的肿瘤，世界范围内，食管癌患者死亡率占肿瘤患者死亡率的第六位，我国是食管癌的高发国家，河南省是高发省份。随着治疗手段的发展，食管癌的预后有所改善，但是其五年生存率仍然不容乐观。浸润转移是引起食管癌患者死亡的主要原因，因此，对食管癌浸润转移机制的探讨已成为研究热点之一。

近来研究发现，在多细胞生物胚胎发育过程中的胚层和组织重建中存在一种现象：上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition，EMT)。最近研究认为它不仅存在于多细胞生物的胚胎发生过程中，同时也存在于多种慢性疾病以及肿瘤的进展过程中。Thiery这样描述上皮性肿瘤发生发展过程中的EMT：正常上皮细胞沿基底膜生长，通过表型遗传学的改变或基因突变，细胞发生转化生成原位癌(此时基底膜仍然保持完整)；继续发展，癌细胞通过EMT形式局部扩散，基底膜变脆，细胞侵入淋巴管和血管，发生转移；在种植部位，癌细胞还可通过间质-上皮转化形成转移瘤。上皮细胞发生EMT，以间质特性获得、上皮细胞极性丧失及运动能力增强为主要特征。这些特点与肿瘤细胞的原位侵袭和远处转移密切相关。目前关于食管鳞癌中是否存在EMT及EMT在食管鳞癌浸润转移中的作用尚未见报道。 selleck产品 EMT是一个极其复杂的过程，包括：(1)细胞间连接(黏附连接、紧密连接、桥粒连接)解体，细胞分散；(2)细胞骨架重排，形成细胞-基质黏附，细胞运动能力增强。(3)细胞基因型的改变：在EMT过程中表达上调的因子主要包括间叶细胞标志物如纤维连接蛋白(fibronectin)、波形蛋白(Vimentin)、神经钙黏素(N-cadherin)等，以及诱导EMT的细胞因子和转录调节因子，如snail、slug，转化生长因子-β(transforming

growth factor-β，TGF-β)，成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factor，FGF)；还有对诱导EMT有辅助作用的基质金属蛋白酶-2(MMP-2)，基质金属蛋白酶-9(MMP-9)等。在EMT过程中表达下调的因子主要包括上皮细胞的标志物如上皮钙黏素(E-cadherin)，β-连环素(β-catenin)，γ-连环素(γ-catenin)，细胞角蛋白18(cytokeratin18)等。已有研究发现TGF-β在诱发EMT中起关键作用。 时间 有关食管鳞癌中是否存在EMT以及食管鳞癌中TGF-β1引发的EMT是否与食管癌的浸润转移有关，目前尚未见报道。本研究探讨了食管癌组织及食管鳞癌细胞系EC9706中TGF-β1的表达及其与E-cadherin及Vimentin的关系；采用针对TGF-β1的反义寡核苷酸干扰技术，抑制食管鳞癌细胞EC9706中TGF-β1的转录活性，探讨抑制TGF-β1对E-cadherin及Vimentin表达的影响，观察转染反义寡核苷酸对细胞形态学的影响及对细胞运动能力的影响，从而探讨食管鳞癌细胞中TGF-β1诱导的EMT；并探讨TGF-β1对食管鳞癌细胞EC9706增殖及凋亡的影响。探讨食管鳞癌浸润转移的分子机制，为食管癌浸润转移的阻断治疗提供理论基础。

材料和方法 1．采用免疫组织化学技术检测了100例手术切除的食管鳞癌组织及其癌旁“正常”粘膜中TGF-β1、E-cadherin和Vimentin蛋白的表达情况。 DZNeP核磁共振 2．采用RT-PCR、免疫细胞化学、流式细胞术对食管鳞癌细胞系EC9706中的TGF-β1、E-cadherin和Vimentin蛋白及mRNA表达进行了检测。 3．针对TGF-β1第一启动子的核苷酸片段设计合成反义寡核苷酸(ASODN)，采用阳离子聚合物瞬时转染培养的人食管鳞癌EC9706细胞。 ①观察TGFβ1-ASODN转染后细胞形态学的变化。 ②采用RT-PCR、免疫细胞化学方法、流式细胞术方法观察TGFβ1-ASODN转染后细胞中TGF-β1mRNA及蛋白表达的变化。 ③采用RT-PCR、免疫细胞化学、流式细胞术方法观察TGFβ1-ASODN转染后细胞中E-cadherine与Vimentin mRNA及蛋白表达的变化。 ④采用细胞划痕试验检测TGFβ1-ASODN转染后细胞迁移能力的变化。 4．采用流式细胞术、MTT观察转染TGFβ1-ASODN后，对细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响。 5．统计学处理：所有数据均经SPSS13.0软件进行统计分析。计数数据采用阳性率表示，阳性率之间的比较采用χ~2检验(Chi-square)，阳性率间相关性采用Kendall相关进行比较；计量数据采用(?)±S表示，两组均数的比较用t检验(t-test)，两组以上均数的比较用方差分析(ANVOA)。显著性水平α=0.05。 结果 1．TGF-β1蛋白在食管鳞癌中的表达(85.0％)明显高于其在癌旁“正常”粘膜中的表达(27.0％)(P＜0.01)，其在深层浸润组中的表达(90.6％)高于其在浅层浸润组中的表达(75.0％)(P＜0.05)。 2．E-cadherin蛋白在食管鳞癌中的表达(43％)明显低于其在癌旁“正常”粘膜中的表达(85％)(P＜0.01)；Vimentin蛋白在食管鳞癌中的表达(23％)高于其在癌旁“正常”粘膜中的表达(0％)(P＜0.05)。 3．在食管鳞癌组织中，TGF-β1的表达与E-cadherin的表达呈负相关关系(T_b=-0.257，P＜0.05)；TGF-β1的表达与Vimentin的表达呈正相关关系(T_b=0.163，P＜0.05)；Vimentin的表达与E-cadherin的表达呈负相关关系(T_b=-0.379，P＜0.

05);TAK组TLR4、NF-κB、IL-6表达较DPN组下降(P
糖尿病心肌病是导致糖尿病患者心血管疾病高发生率和高病死率的主要原因。由于糖尿病心肌病病因复杂,又具有独特的病理生理改变,故其确切的发病机制尚未完全阐明。目前研究认为,丝裂原活化蛋白激酶MAPK信号通路参与胰岛素抵抗、细胞应激、炎症、凋亡等代谢过程,是涉及了多级蛋白激酶的级联反应。本文总结了近年来关于MAPK信号通路与糖尿病心肌病的研究状况,旨在说明从阻断MAPK信号通路角度对糖尿病心肌病进行干预可以成为防治糖尿病心肌病的一个新途径。
干眼是泪液和眼表的一种多因素疾病,其中炎症是干眼发病机制中最关键的因素,因此干眼的炎症机制及抗炎治疗已成为近年研究的热点。但关于干眼患者眼表所发生的信号传导通路改变目前知之甚少,尤其是炎症因子在干眼中激活相关信号传导通路以及受后者所调控的研究还比较少也比较新。本文主要针对炎症因子在干眼中激活相关信号通路及受相关通路调控的研究进展进行综述。
目的观察表皮生长因子(EGF)与TGF-β1对小鼠成釉细胞金属基质蛋白酶-20(MMP20)基因表达的调控作用,并探讨其分子作用机制。方法利用Real time-PCR法分析EGF,TGF-β1对成釉细胞MMP20基因表达的影响;阻断MAPK通路,利用Real time-PCR法分析EGF,TGF-β1对MMP20基因表达的影响;利用双荧光素酶基因报告系统分析EGF,TGF-β1对成釉细胞MMP20基因启动子转录活性的影响。结果与对照组相比,EGF与TGF-β1均显著上调MMP20基因表达;加入MAPK抑制剂后,显著抑制了EGF与TGF-β1对MMP20基因表达的作用。双荧光素酶报告基因检测系统显示:与对照组相比,EGF与TGF-β1显著促进MMP20基因启动子的转录活性。结论

SB505124化学结构 EGF通过P38通路与ERK通路上调MMP20的表达;TGF-β1通过p38通路与JNK通路上调MMP20的表达。
直观的观察雷氏大疣蛛毒素促进神经胶质瘤U87凋亡的形态学变化。首先用蛋白印迹法检测合适的雷氏大疣蛛毒素浓度处理U87细胞,再用该浓度毒素处理U87细胞不同时间;用100pg/m L的雷氏大疣蛛毒素作用48 h诱导神经胶质瘤U87细胞凋亡,然后用倒置相差显微镜,Gimsa染色法,吖啶橙/嗅化乙锭(AO/EB)双重荧光染色法以及流式细胞法,从最直观的形态学上观察雷氏大疣蛛毒素促进神经胶质瘤U87凋亡的形态学变化。实验组的细胞出现很明显的凋亡小体,细胞膜不会破裂,细胞质不会流出,细胞核含有固缩核片段等细胞凋亡的形态学上的特征。雷氏大疣蛛毒素作用神经胶质瘤U87细胞后的形态学的变化,基本包括了细胞凋亡的主要的形态学特征。说明雷氏大疣蛛毒素是通过促进神经胶质瘤U87细胞凋亡从而抑制细胞的增殖。
喹噁啉衍生物(quinoxalines)是一类重要的苯并吡嗪类杂环化合物,喹噁啉环上的2个N原子氧化形成的喹噁啉-1,4-二-N-氧化物(quinoxaline

BKM120细胞系 1,4-di-N-oxides,qdNOs)具有多种生物学活性,包括抗细菌和抗念珠菌活性、促生长活性、抗虫活性和抗肿瘤活性等[1],在医药和农业中有着重要的应用价值和前景。含QdNO结构的动物用喹噁啉类兽药
目的:研究三七皂苷R1对过氧化氢(H2O2)诱导乳鼠心肌细胞损伤的影响及对细胞外调节蛋白激酶1/2(extracellular regulated protein kinase,ERK1/2)与p38通路的调节。方法:以50μmol/L H2O2干预原代培养心肌细胞3 h建立氧化损伤模型,分别观察0.1、1、10μmol/L三七皂苷R1对细胞活力、凋亡及细胞内过氧化物酶LDH、MDA及SOD的表达情况,再检测p-ERK1/2及p-p38蛋白水平;分别以ERK1/2与p38通路特异性阻断剂干预细胞,观察两者对心肌细胞的影响。结果:三七皂苷R1显著增加细胞活力,抑制细胞凋亡,降低LDH与MDA浓度,增加SOD活性,并且能明显降低p-ERK1/2与p-p38表达,以10μmol/L三七皂苷R1干预效果最明显(P
缺血性脑病严重威胁着人类的生命健康,具有高发病率、高死亡率及高致残率等特点。传统的方法有改善血流状态、药物治疗、手术介入及中医中药等。然而,即使缺血后恢复了血液供应,受损的神经元也难以再生,给患者带来了严重的后遗症。如何提高神经元对缺血性损害的抵抗能力,使其在蒙受较严重的缺血时减轻损伤、保持存活,以保证恢复血液供应后这些神经元仍具有正常的功能,是医务人员面临的严峻问题。
溃疡性结肠炎(UC)是直肠黏膜层和黏膜下层的连续性炎症,通常先累及直肠,逐渐向全结肠蔓延,呈慢性反复发作的过程[1]。临床上UC表现多表现为腹痛、腹泻、黏液脓血便和里急后重等[2]。其发病机制尚未明确,大多认为与遗传、环境、免疫等因素相关,主要是遗传易感者在环境的作用下启动了免疫和非免疫系统,导致免疫炎症反应的发生,肠黏膜屏
糖尿病性胃肠功能紊乱是糖尿病患者常见的并发症,大多数症状与胃肠功能受损有关.其发病机制复杂,糖尿病性胃肠功能紊乱的病因是多方面的,不仅包括副感神经和交感神经系统,而且肠神经元、平滑肌细胞、Cajal间质细胞网络、胆碱能受体、神经元型一氧化氮合酶等在糖尿病相关的胃肠功能紊乱也起着重要的作用.本文对糖尿病性胃肠功能紊乱的发病机制作一综述.
目的探讨p38丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)与糖尿病大血管病变的关系及利拉鲁肽对其的干预作用。方法

此网站 24只Wistar大鼠分为正常对照组(NC)和实验组(EXP)。EXP组予高糖高脂饮食联合小剂量STZ腹腔注射建立T2DM大鼠模型。将成模大鼠随机分为糖尿病组(DM)和利拉鲁肽组(LIR),每组各7只。LIR组予利拉鲁肽(100μg/kg,2次/d)皮下注射,共8周;DM组和NC组予等量生理盐水皮下注射。实验结束后,测定各组相关指标;HE染色观察胸主动脉形态,免疫组织化学法检测胸主动脉磷酸化p38MAPK、核因子-κB(NF-κB)和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)蛋白表达水平。结果 HE染色可见DM组胸主动脉呈动脉粥样硬化表现。DM组胸主动脉磷酸化p38MAPK、NF-κB和MCP-1蛋白表达水平较NC组升高(P=0.000),LIR组较DM组降低(P=0.017)。Spearman相关分析显示,胸主动脉磷酸化p38 MAPK与NF-κB、MCP-1蛋白表达呈正相关。DM组血糖、TG、TC、LDL-C、血清细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管内皮黏附分子-1(VCAM-1)、NF-κB水平较NC组升高(P=0.000),较LIR组降低(P<0.

01)水平均低于老年对照组,小剂量组的TC(P＜0.05)、LDL-C(P＜0.01)水平低于与老年对照组,两个他汀组的HDL-C水平与老年对照组无差异(P＞0.05),大剂量组降低TC和LDL-C的作用较小剂量组更显著(P＜0.05);他汀组的脂褐素、β-半乳糖苷酶、MDA含量较老年对照组均显著降低,CAT、NOS、SOD活性均显著增高(P＜0.01)。3.老年大鼠心肌IL-1β、TNF-α和MMP-9的mRNA和蛋白表达水平均较青年大鼠显著增加(P＜0.01);他汀组的IL-1β、TNF-α和MMP-9的mRNA和蛋白表达水平均较老年大鼠显著降低(P＜0.01);大剂量组的作用更显著。4.老年大鼠心肌PPARα、PPARβ/δ和PPARγ三个亚型在mRNA和蛋白水平的表达均较青年组明显降低(P＜0.01);他汀组心肌PPARα、PPARβ/δ和PPARγ三个亚型在mRNA和蛋白水平的表达均较老年大鼠显著增高(P＜0.01)。5.分离培养的老年大鼠心肌细胞的研究中发现,溶剂对照组与空白对照组IL-1β、TNF-α和MMP-9的mRNA和蛋白表达水平均无显著差异(P＞0.05);阿托伐他汀组IL-1β、TNF-α和MMP-9的mRNA和蛋白表达水平均显著低于空白对照组(P＜0.01);PPARs拮抗剂加他汀组IL-1β、TNF-α和MMP-9的mRNA和蛋白表达水平均高于阿托伐他汀组(P＜0.05)。

结论:1.老年大鼠的老化指标如血压、血脂水平,心肌肥厚程度、心肌胶原比例,心肌细胞凋亡数,衰老特异性β-半乳糖苷酶、MDA含量,CAT、NOS、SOD活性等均较青年大鼠有显著改变,阿托伐他汀干预可逆转上述改变。2.老年大鼠心肌炎性因子IL-1β、TNF-α和MMP-9的表达显著增强,阿托伐他汀可抑制上述炎性因子在心肌的表达。3.老年大鼠心肌PPARα、PPARβ/δ和PPARγ三个亚型的表达水平均显著降低,阿托伐他汀干预可上调老年大鼠心肌PPARs三个亚型的表达水平。4.阿托伐他汀抑制老年大鼠心脏炎性因子IL-1β、TNF-α和MMP-9表达的作用机制至少部分与其激活PPARs途径有关。
Egr-1与骨桥蛋白在大鼠血管平滑肌细胞中的相关性及其机制的研究 selleck抑制剂 前言 动脉粥样硬化性疾病、血管重建术后再狭窄(restenosis,RS)、高血压等血管重塑相关性疾病已经愈来愈严重地威胁着人类的健康。目前认为,血管中膜平滑肌细胞(smooth

muscle cell,SMC)向内膜下迁移与增殖是血管重塑的主要病理基础之一。 研究表明,某些转录因子(transcription factors,TF)可以调节多个血管平滑肌细胞(vascular PXD101体内 smooth muscle cell,VSMC)增殖相关基因的表达,从不同层面调控VSMC的迁移与增殖。同时,人们也逐渐注意到细胞外基质(extracellular matrix,ECM)在血管重塑过程中的重要地位。研究发现,ECM在各种外界刺激的作用下,可以作为细胞外信号,经跨膜信号传递系统到达核内,激活一系列调控VSMC增殖的TF,从而推动VSMC的分裂、迁移及增殖。TF与ECM在血管重塑的过程中密不可分,因此将二者有机地联系在一起,并对其相互作用关系进行深入探讨,将有助于全面了解血管重塑的细胞与分子机制。 早期生长反应因子-1(eally growth response factor-1,Egr-1)作为一种锌指结构TF,参与多种基因的调控,与细胞增殖关系密切。大量研究表明,Egr-1在介导VSMC迁移、增殖过程中发挥着重要的作用,成为目前血管重塑机制研究中的焦点。骨桥蛋白(osteopontin,OPN)作为ECM中一种重要的功能性蛋白,被认为是血管损伤重塑过程中重要的始动因素,应用抗OPN抗体可以抑制VSMC的表型转化、迁移和增殖。尽管Egr-1和OPN在介导VSMC迁移、增殖过程中均起着重要的作用,但二者之间的关系尚不清楚。 本课题拟在以往研究的基础上,对培养的大鼠主动脉VSMCs分别稳定转染Egr-1、OPN基因,并检测转染前后OPN与Egr-1的表达变化,从而分析二者的相关性。并应用染色质免疫沉淀(chromatin immunoprecipitation,ChIP)方法检测Egr-1与OPN启动子的结合情况,同时通过向OPN稳定转染细胞株中加入细胞外信号调节蛋白激酶(extracellular

signal-regulated kinase,ERK)的磷酸化抑制剂,检测抑制ERK磷酸化后,OPN上调Egr-1的水平变化,从而对Egr-1与OPN相关性的内在机制进行深入探讨,并为抑制VSMC的迁移、增殖,控制血管壁的不适当重塑提供理论及实验基础。 材料与方法 而且 1、大鼠VSMC的培养 大鼠A10主动脉VSMC细胞株购自ATCC细胞库,用含10%胎牛血清(fetalbovine serum,FBS)的DMEM培养基,在37℃、5%CO_2、饱和湿度的培养箱中培养,用0.25%的胰酶消化、传代。 2、质粒的提纯、扩增及稳定转染 委托TaKaRa公司对pCMV-Egr-1/NEO、pCMV(-)/NEO质粒及pET-28-rOPN/NEO、pET-28(-)/NEO质粒进行提纯、扩增及鉴定,其中pET-28-rOPN/NEO和pET-28(-)/NEO质粒被连于CMV启动子上,以便在VSMC中表达。 待培养的VSMCs生长到80%汇合度时,以100μg/ml～1mg/ml的新霉素(neomycin418,G418)浓度进行最低G418浓度筛选。当培养的VSMCs在6孔板内达到80%汇合度时,应用FuGENE6分别向VSMCs内转染pCMV-Egr-1/NEO、pCMV(-)/NEO质粒及pCMV-ET-28-rOPN/NEO、pCMV-ET-28(-)/NEO质粒。细胞转染24小时(hour,h)后,加入400μg/ml G418的培养液进行培养。2周后,采用有限稀释法将细胞传至96孔板中进行单克隆化培养(于含200μg/ml G418的条件培养液中),待长满后进行扩大培养,并检测细胞中Egr-1、OPNmRNA的表达。 3、应用ERK磷酸化抑制剂阻断ERK信号传导通路 当OPN稳定转染的VSMCs生长至80%汇合度时,向细胞培养液中加入10μMERK磷酸化抑制剂PD98059,继续培养24h后,进行Western blot检测。 4、反转录多聚酶链反应(reverse transcriptase polymerase chainreaction,RT-PCR)检测Egr-1、OPNmRNA 用Trizol Reagent提取VSMCs的总RNA。用RNA PCR Kit Ver.3.

5-8cm。镜下主要显示3种组织学类型:以黏液、血管、炎细胞为主的黏液型;以束状排列梭形细胞为主的细胞密集型;以致密成片的胶原纤维为主的纤维型。5例中3例以黏液型为主伴部分细胞密集型区域,2例以细胞密集型为主伴灶状纤维型和黏液型区域。全部病例见淋巴浆细胞浸润。1例局部核分裂数>5个/10HPF,其余核分裂数1-2个/10HPF。未见核异型性或坏死。免疫组化染色显示5例均呈平滑肌蛋白(smooth muscle atin,SMA),Vimentin和间变性淋巴瘤激酶(anaplastic lymphoma kinase,ALK)阳性表达,1例局灶见Desmin阳性表达,而S-100、CD34、CD117、CD21、CD35、CD68均阴性。随访2-5年,1例复发,其余无复发或转移。结论胃IMT是一种具有中间性生物学行为的肿瘤,保守治疗预后良好。
经3年多临床攻关,复旦大学附属肿瘤医院陈海泉教授领衔的课题组,发明了一种能快速准确检测携带”ALK融合基因”的肺癌分子诊断技术,可为患者节省巨额检测费用,并为晚期肺癌患者选择”有特效的”分子靶向药物进行个性化治疗赢得宝贵时间。相关论文已发表在最近出版的国际著名肿瘤学期刊《临床癌症研究》上。
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目的:探讨非小细胞肺癌(non-small

selleck inhibitor cell lung cancer,NSCLC)组织中表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)及其磷酸化水平与患者临床生物学特征、临床治疗疗效间的关系。方法 :收集NSCLC患者75例,采用免疫组化检测其肿瘤组织中EGFR和磷酸化EGFR(p-EGFR)的表达水平,分析其与肺癌生物学特征及疗效间的关系。结果:本研究NSCLC患者的肿瘤组织中EGFR表达阳性率达78.67%,p-EGFR阳性率为56.00%,均明显高于癌旁肺组织;EGFR表达水平与肿瘤细胞的分化程度有关,而p-EGFR表达水平与肿瘤细胞的分化程度、淋巴结转移及临床分期均密切相关,低分化肿瘤细胞、发生肿瘤转移者的肿瘤组织、晚期肿瘤组织中的p-EGFR表达水平均明显升高。同时,p-EGFR水平与NSCLC患者临床治疗的有效率密切相关,p-EGFR表达阴性的患者其治疗有效率明显高于阳性者。结论:EGFR的磷酸化形式在判断NSCLC疾病进展及临床疗效时可能更有实用意义,在评估NSCLC患者的临床疗效及预后判断中具有一定价值。
正如美国癌症研究协会(AACR)的年会已实际成为肿瘤基础研究的国际年会一样,美国临床肿瘤学会(ASCO)的年会,也早已演变为肿瘤临床研究的国际年会。每到春末夏初,气候宜人之际,各国临床肿瘤研究人员即纷纷启程前往美国著名的风城芝加哥,开始他们的又一轮征服癌症的麦加之旅。跨国药企巨头和崭露头角的生物制药公司也借机云集于此,展示其最新产品和临床试验结果。美轮美奂的商业展台让人目
美国临床肿瘤学会大会近期在美国芝加哥召开。在6月5日会议上,多家制药商和研究机构发布新药物,对治疗癌症提出新观点,一些药物获得临床好评,一些疗法成为未来治癌方向。

肺癌是全球癌症死亡的主要原因,仍是肿瘤科最大的挑战之一。尽管早期手术、放化疗和靶向治疗等治疗方式不断改进,使约20%的患者有根治性治疗的机会,但肺癌患者的5年生存率仍仅有15%。随着肿瘤免疫治疗研究的不断发展,发现癌症疫苗通过激活T、B淋巴细胞,增强免疫应答来清除肿瘤细胞,从而达到治疗癌症的目的。对于靶向黏蛋白-1(MUC-1)抗原表位的疫苗已经进行大量的临床研究,并取得了突破性进展。本文将围绕MUC-1疫苗治疗非小细胞肺癌(NSCLC)的研究进展作一综述。
目的研究白花蛇舌草注射液联合GP方案治疗晚期非小细胞肺癌及对患者免疫功能的影响。方法选择晚期非小细胞肺癌患者80例为研究对象,随机分成两组,各40例。对照组采用GP方案治疗;观察组采用白花蛇舌草注射液联合GP治疗方案。观察两组患者疗效,中医证候情况,生活质量情况,免疫功能,不良反应及血管内皮生长因子(VEGF)含量,并做比较分析。结果

Sapitinib 价格 MLN0128供应商 3个疗程后观察疗效,观察组中医证候改善有效率90.00%、卡氏评分增加稳定率97.50%,高于对照组的55.00%和67.50%,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。观察组CD3+、CD4+、CD8+和CD4+/CD8+含量均高于对照组,差异有统计学意义(P﹤0.01);观察组胃肠道症状、白细胞减少等轻于对照组,差异有统计学意义(P﹤0.05);观察组VEGF水平低于对照组,差异有统计学意义(P﹤0.01)。结论白花蛇舌草注射液联合GP方案治疗晚期非小细胞肺癌患者疗效显著,能够改善患者生活质量。
目的探讨氨柔比星联合顺铂治疗初治广泛期小细胞肺癌患者的疗效和不良反应。方法 4例初治广泛期小细胞肺癌患者给予氨柔比星+顺铂全身化疗6个周期,观察其疗效和不良反应。结果 4例患者中3例最佳疗效达部分缓解;1例疗效为疾病进展。最长随访66个月,1例患者目前仍在随访中。平均无疾病进展时间为19.6个月,平均总生存期为26.

在白藜芦醇(0-250μM)作用12h后,T24细胞生存率范围为49.8%-97.0%,在作用24和48 h后,细胞生存率范围分别为27.7%-98.0%和20.6%-95.7%。 3.经流式细胞仪检测,不同浓度白藜芦醇(50,100,150和200μM)作用24小时能明显使处于G1期T24细胞增多,细胞明显阻滞于G1期。 4.白藜芦醇(0,50,100,150和200μM)作用24小时后,随着作用浓度的增加,T24细胞Cyclin Dovitinib 价格 D1和CDK4的表达逐渐降低,而WAF-1/p21表达逐渐增强,呈显著的浓度依赖性。 结论白藜芦醇能显著抑制T24细胞增殖,其抑制作用呈时间和剂量依赖性。白藜芦醇可以T24细胞明显阻滞于G1期,其分子机制可能是抑制T24细胞中Cyclin D1和CDK4的表达,并增强了WAF-1/p21蛋白的表达。 第二部分白藜芦醇对人膀胱癌T24细胞凋亡的影响 目的研究白藜芦醇在体外对人膀胱癌细胞系T24细胞凋亡的诱导作用,并探讨其诱导凋亡的相关分子机制。 方法采用流式细胞仪(PI和annexin V双染法)检测T24细胞凋亡的变化。采用Western blotting方法检测不同浓度白藜芦醇(0,50,100,150和200μM)作用24小时后,T24细胞中PI3K/Akt、ERK1/2和p38三条信号通路的改变,同时研究了Bcl-2家族、caspase-3和caspase-9等蛋白在白藜芦醇作用后表达的变化。

结果 1.不同浓度白藜芦醇(0,50,100,150和200μM)作用于T24细胞24小时后能明显诱导细胞凋亡,凋亡的诱导作用呈显著剂量依赖性。 2.光学显微镜显示不同浓度白藜芦醇(0,50,100,150和200μM)作用于T24细胞24小时后使细胞密度呈剂量依赖性降低,细胞形态改变也呈剂量依赖性,同时观察到凋亡细胞所具有的形态学改变。

3.通过流式细胞仪(PI和annexin V双染法)检测发现白藜芦醇作用于T24细胞24小时后凋亡细胞数量呈剂量依赖性增加。白藜芦醇(0-200μM)作用24小时后产生的早期凋亡细胞为4.0%-14.1%;晚期凋亡细胞分别为2.6%-36.7%,总的凋亡细胞为6.6%-47.5%。 4.白藜芦醇(0-200μM)作用24小时后,随着作用浓度的增加,T24细胞phospho-Ser473-Akt与phospho-ERK1/2的表达逐渐降低,但t-Akt与t-ERK1/2未见改变;phospho-p38表达逐渐增强,t-p38表达未见改变,三种信号蛋白表达变化均呈显著的浓度依赖性。 5.白藜芦醇(0-200μM)作用24小时后,随着作用浓度的增加,T24细胞中Bcl-2与Bcl-xL的表达逐渐降低,而Bax表达逐渐增高,呈显著的浓度依赖性。 以及 6.白藜芦醇(0-200μM)作用24小时后,随着作用浓度的增加,T24细胞中Bax/Bcl-2的比例逐渐增高,呈显著的浓度依赖性。 7.白藜芦醇(0-200μM)作用24小时后,T24细胞procaspase-3与procaspase-9表达降低,而caspase-3与PARP激活片段表达逐渐升高。 结论白藜芦醇能诱导T24细胞凋亡,凋亡的诱导作用呈显著剂量依赖性。白藜芦醇能显著抑制T24细胞PI3K/Akt信号通路的激活,调节MAPK通路的信号变化(ERK1/2与p38),进而引起Bcl-2家族蛋白变化,激活caspase-3,最终诱导凋亡发生。

GSK1349572分子量 第三部分白藜芦醇对人膀胱癌T24细胞侵袭转移的影响 目的研究白藜芦醇在体外对人膀胱癌细胞系T24细胞侵袭转移能力的影响及其可能机制。 方法MTT法检测白藜芦醇对T24细胞粘附纤维连接蛋白(fibronectin)能力的影响,Transwell小室进行人工重组基底膜侵袭实验检测白藜芦醇对T24细胞侵袭能力的影响,划痕愈合试验检测白藜芦醇对T24细胞迁移能力的影响。采用Western blotting方法检测白藜芦醇(0,10,25,和50μM)作用24小时后的T24细胞中MMP-9蛋白的表达。 结果 1.白藜芦醇(0-200μM)作用90分钟后,随着作用浓度的增加,T24细胞粘附纤维连接蛋白能力逐渐降低,呈显著的浓度依赖性。 2.白藜芦醇(0-50μM)作用不同时间(0,8,16和24小时)后,T24细胞的迁移能力逐渐降低,呈显著的浓度和时间依赖性。 3.体外的侵袭试验显示白藜芦醇(0-50μM)作用24小时后,随着作用浓度的增加,T24细胞侵袭能力逐渐降低,呈显著的浓度依赖性。 4.白藜芦醇(0-50μM)作用24小时后,随着作用浓度的增加,T24细胞的MMP-9蛋白表达逐渐降低,呈显著的浓度依赖性。 结论白藜芦醇能显著抑制T24细胞的粘附、迁移和侵袭能力。白藜芦醇这种侵袭转移抑制能力可能与降低MMP-9的表达有关。 第四部分白藜芦醇抗肿瘤作用的体内实验研究 目的研究白藜芦醇对裸鼠膀胱癌移植瘤生长的抑制作用及其可能机制。 方法无菌条件下,裸鼠右后背侧部皮下接种膀胱癌T24细胞悬液,接种后,裸鼠在无菌、恒温和恒湿条件下饲养,待肿瘤直径长成约3mm大小时,采用随机数字法随机将24只Balb/C裸鼠分为3组,A组不予任何处理;B组腹腔内注射0.1ml丙二醇;C组腹腔内注射白藜芦醇(溶于0.1ml丙二醇,30 mg/kg)。每日给药1次,持续4周,每2日测量一次肿瘤体积。第28天处死裸鼠后取下标本,免疫组织化学法观察肿瘤组织CD34的变化,RT-PCR法检测肿瘤组织相关基因VEGF和FGF-2的表达情况。 结果 1.持续观察4周后,A组与B组移植瘤生长情况无明显区别,肿瘤体积变化无明显区别;实验前十天,C组移植瘤生长情况与另外两组无明显区别,从实验第十二天,C组肿瘤体积开始明显小于另外两组。 2.通过免疫组织化学法观察肿瘤组织中CD34的变化,发现白藜芦醇处理组中,肿瘤标本CD34表达明显降低。 3.

01)、体重(P)<0.01)、海马重(P<0.01)、背最长肌重(P<0.01)、腰大肌重(P<0.01)、肝脏重(P<0.01)以及背最长肌重／体重(P<0.01)极显著地高于大白猪；二花脸猪血清瘦素(P<0.05)和甘油三酯(P<0.05)含量显著高于大白猪,皮质醇(P<0.01)、乳酸(P<0.01)、胆固醇(P<0.01)、高密度脂蛋白(P<0.01)、低密度脂蛋白(P<0.01)和睾酮(P<0.01)含量极显著地高于大白猪；二花脸猪肝糖原含量(P<0.05)显著高于大白猪,AMP含量(P<0.05)的mRNA水平显著低于大白猪,肝脏SREBP-1(P
Akt是一种丝氨酸/苏氨酸激酶,又称蛋白激酶B (Protein kinase B, PKB),它位于mTOR的上游,在自噬调控中通常认为起负调控作用。而细胞自噬(Autophagy)是真核生物用于清除胞内聚集物、损伤细胞器而维持其稳态平衡的一种溶酶体降解途径。细胞自噬不仅在细胞生长发育、成熟分化等过程中起重要作用,且与多种疾病发生、病毒感染与免疫等密切相关。我们用电镜、激光共聚焦显微镜、免疫印迹检测发现稳定表达HBV基因组的HepG2.215细胞自噬较HepG2细胞显著增强,说明HBV感染能够增强细胞基础自噬,同时发现在HepG2.215细胞中Akt磷酸化水平异常高表达,这暗示着Akt在细胞自噬和HBV复制中起着重要作用,我们用API-2抑制Akt磷酸化后发现HepG2.215细胞自噬体减少,LC3脂酰化降低。通过进一步的研究发现,API-2引起的自噬降低是通过减少自噬基因Beclinl的表达,降低正调控自噬基因Erk和GSK的磷酸化实现的。这一结果表明Akt正调控HepG2.215细胞自噬。同时进一步丰富了Akt信号通路在细胞自噬中的理论研究。

MLN0128体外 {TNF-alpha 抑制剂|TNF alpha 抑制剂|TNF-alpha 抑制剂|TNF alpha 抑制剂|TNF-alpha 抑制剂|TNF alpha 抑制剂|TNF-alpha 抑制剂|TNF alpha 抑制剂|TNF-alpha 抑制剂|TNF alpha 抑制剂|TNF-alpha 抑制剂|TNF alpha 抑制剂|TNF-alpha 抑制剂|TNF alpha 抑制剂|TNF-alpha 抑制剂|TNF alpha 抑制剂|TNF-alpha 抑制剂|TNF alpha 抑制剂|TNF-alpha 抑制剂|TNF alpha 抑制剂|TNF-alpha 抑制剂|TNF alpha 抑制剂|TNF-alpha 抑制剂|TNF alpha 抑制剂|TNF-alpha 抑制剂|TNF alpha 抑制剂|TNF-alpha 抑制剂|TNF alpha 抑制剂|TNF-alpha 抑制剂| buy TNF-alpha 抑制剂|TNF-alpha 抑制剂半抑制浓度|TNF-alpha 抑制剂价格|TNF-alpha 抑制剂花费|TNF-alpha 抑制剂溶解度|TNF-alpha 抑制剂购买|TNF-alpha 抑制剂制造商|TNF-alpha 抑制剂查找购买|TNF-alpha 抑制剂订单|TNF-alpha 抑制剂 mouse|TNF-alpha 抑制剂 chemical structure|TNF-alpha 抑制剂分子量|TNF-alpha 抑制剂 molecular weight|TNF-alpha 抑制剂数据表|TNF-alpha 抑制剂 supplier|TNF-alpha 抑制剂体外|TNF-alpha 抑制剂细胞系|TNF-alpha 抑制剂 concentration|TNF-alpha 抑制剂 nmr|TNF-alpha 抑制剂体内|TNF-alpha 抑制剂 clinical trial|TNF-alpha 抑制剂s|TNF-alpha signaling 抑制剂|TNF-alpha pathway 抑制剂|TNF-alpha 信号通路 抑制剂|TNF-alpha signaling 抑制剂s|TNF alpha pathway 抑制剂s|TNF-alpha 信号通路 抑制剂s|TNF-alpha 抑制剂 library|TNF-alpha activity inhibition|TNF-alpha activity|TNF-alpha inhibition|TNF-alpha 抑制剂s library|TNF alpha 抑制剂 libraries|TNF-alpha 抑制剂 screening library|TNF-alpha high throughput screening|TNF-alpha 抑制剂s high throughput screening|TNF-alpha phosphorylation|TNF-alpha screening|TNF-alpha assay|TNF-alpha animal study| 乙肝病毒(Hepatitis B viru, HBV)感染是严重危害我国人口健康的常见传染病之一。统计显示,目前我国HBV感染者达1.2亿。由于长期的病毒感染,病情反复发作,使得肝功能受损,有很多病人最终会发展成肝细胞癌。目前,无论对乙肝病毒感染者还是肝癌病人均需要更有效的治疗手段,因此对其病因学以及新的治疗手段的研究显得尤为重要。化合物Gliocladicillin C (C77)是分离的Gliocladium

sp的发酵产物中获得的Epipolythiodioxopiperazines (ETPs)类分子。该类化合物能抑制肿瘤细胞增殖,对细菌、病毒等病原体有杀伤作用。我们发现该类化合物早期能引起细胞自噬,而自噬又是HBV复制所必须的。那C77是否通过自噬对HBV复制产生一定影响呢?通过定量PCR检测表明C77是通过降低自噬基因的表达来抑制HBV-X基因的转录量,从而影响HBV复制。 Akt促进细胞自噬而自噬又与HBV复制关系密切,那Akt是否与HBV复制有关系呢?我们用Akt抑制剂API-2发现既可以抑制HBV的复制,也可以降低细胞自噬。激光共聚焦显微镜显示API-2可以减少HepG2.215自噬体的数量。敲降自噬相关基因LC3、p62和Beclinl抑制HBV的复制,而敲降Akt减少了LC3-Ⅱ水平,抑制了病毒的复制。所以我们的实验结论：C77是通过降低自噬相关基因表达来抑制病毒复制的。Akt信号是维持HepG2.215细胞高水平基础自噬自噬所必须的,Akt促进HBV的复制是通过调节细胞自噬来实现的。
Ghrelin是主要由胃内分泌细胞和下丘脑弓状核合成的28个氦基酸组成的肽类激素,有很强的促摄食和促生长激素分泌作用Gherlin的生理功能主要通过激活ghrelin受体,即1a型促生长激素释放受体(growth hormone secretagogue receptor la, GHS-Rla)而实现。GHS-Rla是一种典型的G蛋白(Gq/11)偶联受体,由7个跨膜区域构成。中枢神经系统内,GHS-Rla除在下丘脑有大量农达外,在丘脑外的其它多个脑区包括海马、杏仁核、黑质致密带和中脑腹侧被盖区等都有较高表达,提示ghrelin及其受体GHS-Rla对多种脑高级功能(如情绪和记忆等)可能有重要的调节作用。Ghrelin及其受体GHS-Rla对情绪和记忆等脑高级功能的调控已有报道,但机制仍不清楚。 杏仁核是情绪学习和记忆最重要的脑结构,被认为是整个情绪记忆神经网络的核心,在情绪记忆的获取、巩固和提取中都发挥重要作用。研究发现,杏仁核接受ghrelin中经元的纤维投射,而GHS-Rla

AG-14361 花费 mRNA在大鼠外侧杏仁核有远比中央核丰富的表达。这些证据提示ghrelin/GHS-Rla及其激活的下游信号通路可能调节外侧杏仁核的神经元活动,进而影响情绪记忆的形成和维持。味觉条件性厌恶(conditioned taste aversion, CTA)是实验室常用的学习记忆行为范式,被广泛用于研究情绪记忆的获取、巩固及消退过程及其机制。研究表明外侧杏仁核是听觉条件性恐惧和味觉条件性厌恶这两种情绪记忆获取和储存的重要脑区。因此,本课题在已有研究基础上,以外侧杏仁核局部神经环路为研究对象,运用局部脑区微量注射和味觉厌恶行为测试等技术手段,深入探讨了ghrelin及其受体GHS-Rla对味觉厌恶情绪记忆的调控作用,并对其可能的分子机制进行了初步探讨。研究结果总结如下 1.外侧杏仁核微量注射ghrelin (12ng/0.5μl/side)选择性抑制大鼠CTA的获取,而对CTA的巩固和提取无明显作用。 2. GHS-Rla特异性拮抗剂YIL718预处理可完全阻断ghrelin对CTA获取的抑制作用,而YIL718本身对CTA的获取无影响。 3.磷脂酶C(PLC)的选抒性抑制剂U73122可阻断ghrelin对CTA获取的抑制作用,U73122本身对CTA的获取无明显影响。 4. Protein kinase C (PKC)抑制剂chelerythrine预处理不影响ghrelin对CTA获取的抑制作用。 5.PI1K激酶的选择性抑制剂LY294002可完全阴断ghrelin对CTA获取的抑制作用,而与其结构类似的对照化合物LY303511无此作用。LY294002和LY303511本身对CTA的获取均无明显影响。 6. mTOR激酶的选择性抑制剂rapamycin可部分阻断ghrelin对CTA获取的抑制作用,但rapamycin本身对CTA的获取元明显影响。 7.

将构建成功的重组腺病毒载体Ad5-Wnt-3a转染Jurkat细胞，筛选出最适转染滴度MOI＝60，转染率为(42.54±1.63)%。 2.Wnt-3a转染后，实验组有效表达Wnt-3a基因；GSK-3β总蛋白的表达量显著下调；β-catenin蛋白表达量明显上调，为对照组的2.38倍；细胞增殖明显，增殖率约为21.2%，细胞G0/G1期下降，S期升高，未见明显细胞凋亡。 3.RT-PCR检测结果显示实验组细胞内c-myc和cyclin D1mRNA表达分别为（0.75±0.04）和（0.75±0.03），相比空载体组，表达水平的增高具有统计学意义。而Survivin mRNA表达水平未见明显改变。 结论 腺病毒介导的Wnt-3a抑制Jurkat细胞中GSK-3β蛋白的表达，同时可激活细胞内经典Wnt/β-catenin信号途径，活化的β-catenin促进Jurkat细胞增殖与细胞周期改变，未见明显细胞凋亡，可能的机制是通过上调下游靶基因c-myc和cyclin

D1的表达实现。 第三部分抑制GSK-3β活性对儿童急性淋巴细胞白血病骨髓单个核细胞凋亡的机制研究 Autophagy Compound Library 目的 以ALL患儿原代细胞为实验细胞，通过抑制剂氯化锂（LiCl）和SB216763抑制GSK-3β活性后，进一步探讨GSK-3β介导的Wnt/β-catenin与NF-κB信号通路诱导ALL细胞凋亡的分子机制。 方法 分别应用LiCl和SB216763抑制ALL细胞内GSK-3β，经过体外短期培养，①Western blotting方法检测ALL细胞中GSK-3β及其下游信号分子β-catenin与NF-κB p65的定位和表达水平的变化；②凝胶迁移率实验（EMSA）检测核转录因子NF-κB的DNA结合活性；③AnnexinV-PE/7-AAD双染法结合流式细胞仪检测细胞凋亡；④RT-PCR检测Wnt/β-catenin与NF-κB信号通路下游靶基因survivin、c-myc和cyclinD1表达水平的变化。

结果 1.ALL细胞经GSK-3β抑制剂LiCl和SB216763处理后，GSK-3β在细胞浆中的蛋白水平未见明显变化，而其胞核蛋白表达量明显下降；β-catenin蛋白在细胞浆中的表达量显著增加，而转位入核的β-catenin表达略有增加；核转位蛋白NF-κB P65在胞浆/胞核中均无明显变化，但核内NF-κB P65的DNA结合活性明显降低。 2.SB216763浓度梯度增加（5、10、15μM）的实验组细胞凋亡率随之升高，分别为（36±5）%、（52±7）%和（70±4）%，LiCl在其细胞亚毒性浓度内（5、10mM），诱导ALL细胞的凋亡呈浓度依赖性，与对照组相比均有统计学意义。 很少 3.对照组细胞经GSK-3β抑制剂LiCl和SB216763处理后，发现对照组细胞的凋亡率为15%~20%，未受到明显影响。但Western blotting结果显示转位入核的β-catenin蛋白表达显著增加。 4.RT-PCR结果显示survivin mRNA的表达水平明显下降，c-myc和cyclin D1的表达水平未见明显变化。 结论 1.以ALL原代细胞作为实验细胞，抑制其GSK-3β活性后，并不改变核转位蛋白NF-κB P65在胞浆/胞核中的表达，却下调NF-κB P65的转录活性，并通过下调抗凋亡基因survivin的表达而促进ALL细胞的凋亡；β-catenin的表达水平增加并未明显影响细胞的凋亡与增殖，其机理有待进一步的研究。 2.对照组细胞经GSK-3β抑制剂处理后，细胞凋亡未受明显影响，推测可能与Wnt/β-catenin信号的活化有关。
实验目的：

通过高脂饮食和STZ诱导建立2型糖尿病大鼠模型，利用Langendorff离体心脏灌流模型，观察高压氧预处理对正常及糖尿病大鼠心肌缺血/再灌注损伤的影响，并探讨其对糖尿病大鼠心肌缺血/再灌注损伤保护作用及其机制，寻找保护糖尿病心肌缺血/再灌注损伤的新方法。 实验方法： 第一部分实验：75只成年雄性Wistar大鼠，体重250-300g，随机分为正常组（N组30只）：给予基础饲料喂养；糖尿病实验组（D组，45只）：高脂饲料喂养4周后给予2%STZ一次性腹腔注射（40mg／kg），1周后尾尖血检测血糖，以血糖＞16.7mmol／L为糖尿病模型成功。大鼠继续常规饲料喂养2个月。 将正常大鼠（N组）及成模后糖尿病大鼠（D组）各自分为三组，每组10只，分别为正常对照组（N-C组）、正常缺血/再灌注组（N-I／R组）、正常高压氧预处理组（N-P组）、糖尿病对照组（D-C组）、糖尿病缺血/再灌注组（D-I／R组）、糖尿病高压氧预处理组（D-P组）。生物机能试验系统记录血液动力学指标，包括HR、LVSP、+dp/dtmax，留取冠脉流出液检测心肌酶。心肌组织匀浆利用试剂盒测定SOD的活性及MDA的生成量。灌流结束后行TTC染色，测定心肌梗死面积。行心肌HE染色观察心肌组织结构的变化。 购买PF299 第二部分实验：2型糖尿病动物模型建模方法同第一部分实验。增加沃尔曼青霉素（wortmannin）干预组，具体分组如下：正常对照组（N-C组）、正常缺血/再灌注组（N-I／R组）、正常高压氧预处理组（N-P组）、正常高压氧预处理加wortmanmin组（N-W组）、糖尿病对照组（D-C组）、糖尿病缺血/再灌注组（D-I／R组）、糖尿病高压氧预处理组（D-P组）、糖尿病高压氧预处理加wortmanmin组（D-W组）。制备大鼠离体心脏灌流（Langendorff）模型方法同第一部分实验。用TUNEL方法检测心肌细胞的凋亡，计算凋亡指数。免疫组化法检测心肌细胞caspase-3、Bcl-2、Bax、细胞色素C、Akt、pAkt、GSK3及P-GSK3表达情况。蛋白质免疫印迹法（western blotting）检测组织Akt（pAkt）及GSK3（PGSK3）蛋白含量。 统计分析：数据处理应用Spss13.

Sm. (TFDF) on osteoblasts (OB)

differentiation and the expression of p38 MAPK and BMP-2/Smads signaling in osteoblasts after treatment by Advanced Glycation End Products (AGEs), so as to explore the action mechanism for preventing and curing osteoporosis of TFDF. [Method] Primary osteoblasts of newborn Sprague-daweley rats were extracted and cultured by the double enzyme digestion method, and its biological characteristics were observed. pNPP, ELISA and Alizarin dyeing were respectively used to test ALP, Type I collagen (Col I), osteocalcin (BGP), BMP-2, and mineralization of osteoblasts after treatment by different concentration of AGEs and after treatment by different concentration of TFDF and AGEs (400 mg/L). Western-blot was

used to detect p38 and PI3K Inhibitor Library购买 Smad1/5/8 protein phosphorylation after treatment by TFDF and AGEs (400 mg/L). [Result] The levels of ALP, Type I collagen, osteocalcin and mineralization in osteoblasts treated by different concentrations of AGEs (200, 400 and 800 mg/L) were lower than those in the control group. TFDF could increase ALP, Type I collagen, osteocalcin, BMP-2 and mineralization of osteoblasts in a dose-dependent manner after treatment by AGEs (400 mg/L). TFDF (50 mg/L) can increase protein phosphorylation of p38 and Smad1/5/8 in osteoblasts after treatment by AGEs (400 确认细节 mg/L). [Conclusion] AGEs can decrease LEE011 differentiation and mineralization of osteoblasts. TFDF can increase differentiation and mineralization of osteoblasts in a dose-dependent manner after treatment by AGEs, which may be related to p38 and BMP-2/Smads signaling.
本试验旨在研究丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路抑制剂对断奶仔猪小肠形态和肠通透性的影响。选用体重约为5.8

kg的24头21日龄杜×长×大断奶仔猪,随机分成4组,每组6头。试验组断奶前30 min分别腹腔注射p38 MAPK抑制剂(SB203580,Ⅰ组)、c-Jun N末端激酶(JNK)抑制剂(SP600125,Ⅱ组)和胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)抑制剂(PD98059,Ⅲ组),对照组注射等量的生理盐水。于断奶后36 h屠宰仔猪取样待测。结果表明:Ⅰ组空肠绒毛高度和绒毛高度/隐窝深度均显著高于对照组(P<0.05),隐窝深度显著低于对照组(P<0.05);与对照组相比,Ⅰ组和Ⅱ组仔猪血浆D-乳酸、二胺氧化酶含量显著降低(P<0.05),而Ⅲ组仔猪血浆D-乳酸含量显著高于对照组(P<0.05);Ⅰ组空肠黏膜促炎细胞因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)和干扰素γ(IFN-γ)水平显著低于对照组(P<0.05),与对照组相比,Ⅱ组TNF-α和IL-1β水平显著降低(P<0.05),而Ⅲ组TNF-α水平显著高于对照组(P0.05)。结果提示,在断奶应激致仔猪小肠黏膜屏障受损过程中,抑制p38 MAPK和JNK通路后,肠屏障得到改善,而抑制ERK1/2通路后肠屏障损伤有加重的趋势。
白细胞介素简称白介素,是指在白细胞或免疫细胞间相互作用的细胞因子,它在传递信息,激活与调节免疫细胞,介导T、B细胞活化、增殖与分化及在炎症反应中起重要作用。近期研究发现[1],IL-23/IL-17轴在炎症性疾病的发病机制中可能处于关键地位,并有望成为新的治疗靶标。IL-23
目的探讨我国汉族人群p38βMAPK基因多态性对mRNA表达的影响。方法纳入正常人群98名,经测序分析rs2072878位点AA基因型82名,AG基因型16名。分别选取AA与AG基因型组各14名,提取外周血单核细胞(PBMC),提取RNA与蛋白。p38βMAPK mRNA的测定采用实时荧光定量PCR,p38 MAPK总蛋白表达的检测采用SDS-PAGE电泳-蛋白免疫印迹法。结果 p38βMAPK rs2072878的AA基因型人群mRNA表达水平显著低于AG基因型人群[(0.485±1.143)vs(2.250±2.719),P=0.034]。p38MAPK蛋白表达水平AA基因型组与AG基因型组差异无统计学意义[(1.347±0.309)vs(1.007±0.500),P=0.

AGE-LDL对人肾小管上皮细胞MAPK的影响

1. AGE-LDL对人肾小管上皮细胞MAPK表达的影响 人肾小管细胞上皮(HK-2细胞)分别加入100μg/ml AGE-LDL和10μg/ml LPS于0、5min、15min、30min及1小时收集细胞。Western-blot检测MAPK激酶(p38、JNK、ERK)和磷酸化MAPK激酶(p-p38、p-JNK、p-ERK)的蛋白表达情况。 2.抑制MAPK后,AGE-LDL诱导人肾小管上皮细胞IL-6 mRNA的变化 人小管细胞上皮(HK-2细胞)DMSO、PD98059、SB203580 (p38)、SP420119 (JNK). UO126(ERK)各10μmol/ml预孵2小时后,用AGE-LDL(100μg/ml)刺激6小时,收集细胞,提取总RNA,行RT-PCR检测IL-6 mRNA。 3.阻断TLR4后,AGE-LDL对人肾小管上皮细胞MAPK表达的影响 肾小管细胞上皮(HK-2细胞)使用TLR4 siRNA 100pmol有效干扰后或者是20μmol/L鼠抗人TLR4抗体预孵2小时后,分别加入100μg/ml AGE-LDL刺激15min后收集细胞。Western-blot检测MAPK激酶(p38、JNK、ERK)和磷酸化MAPK激酶(p-p38、p-JNK、p-ERK)的蛋白表达情况。 九.AGE-LDL对人肾小管上皮细胞NF-KB的影响 1. AGE-LDL对人肾小管上皮细胞NF-KB/p65表达的影响 selleck化学 人肾小管细胞上皮(HK-2细胞)分别加入100μg/ml AGE-LDL和10μtg/ml LPS于0、5min、15min、30min、1h、3h及6小时收集细胞。Western-blot检测NF-κB/p65和磷酸化NF-κB(p-p65)的蛋白表达情况。 2. AGE-LDL对人肾小管上皮细胞NF-KB/p65的核转移 人肾小管细胞上皮(HK-2细胞)培养于置有盖玻片的6孔细胞培养板上分别加入100μg/ml AGE-LDL或10μg/ml LPS刺激0、15min和30min。固定,封闭后,加入抗人NF-κB/p65抗体一抗过夜,用非免疫兔IgG作阴性对照,Alex488荧光标记的羊抗兔二抗避光孵育45分钟,Hochest

33258染核,树脂封片。在共聚焦显微镜下观察、拍片。 3.阻断TLR4后,AGE-LDL对人肾小管上皮细胞NF-κB表达的影响 肾小管细胞上皮(HK-2细胞)使用TLR4 siRNA 100pmol有效干扰后或者是20μtmol/L鼠抗人TLR4抗体预孵2小时后,分别加入100μg/ml AGE-LDL刺激15min后收集细胞。Western-blot检测NF-κB/p65和磷酸化NF-κB(p-p65)的蛋白表达情况。 4. Myd88/TRIF siRNA干扰后,AGE-LDL对小管上皮细胞NF-KB表达的影响 肾小管细胞上皮(HK-2细胞)使用Myd88/TRIF siRNA 100pmol有效干扰后,分别加入100μg/ml PI3K Inhibitor Library mouse AGE-LDL或10μg/ml LPS刺激15min后收集细胞。Western-blot检测NF-KB/p65和磷酸化NF-κB(p-p65)的蛋白表达情况。 5.阻断NF-κB干扰后,AGE-LDL诱导人肾小管上皮细胞IL-6 mRNA的变化肾小管细胞上皮(HK-2细胞)使用NF-KB/p65 siRNA 100pmol有效干扰后或者是10(imol/L NF-κB/p65抑制剂Bay11-7082预孵2小时后,分别加入100μtg/mlAGE-LDL刺激6h后收集细胞,提取总RNA,行RT-PCR检测IL-6 mRNA。 十.CD36参与AGE-LDL诱导人肾小管上皮细胞表达IL-6 肾小管细胞上皮(HK-2细胞)使用CD36 siRNA 100pmol有效干扰后,或者是20μmol/L鼠抗人CD36抗体预孵2小时后,分别加入100μg/ml AGE-LDL刺激6小时后收集细胞,提取总RNA,行RT-PCR检测。

十一.统计学方法 所有数据均代表3次重复实验的结果,以X±S表示。多个样本均数的比较采用One-Way ANOVA,两两比较采用LSD和SNK。实验中不同时间点之间的同一变量比较采用独立样本t检验。所有统计由统计软件SPSS13.0完成,P0.05)。 3.3 TLR4中和抗体抑制(?)AGE-LDL促进的HK-2细胞产生IL-6 mRNA 使用鼠抗人TLR4中和抗体,可以抑制(?)AGE-LDL促进的HK-2细胞产生IL-6mRNA (F= 142.096, P=0.000)。结果示10μg/ml和20μg/ml抗体预孵细胞后,可以有效的降低AGE-LDL诱导HK-2产生IL-6 mRNA水平。 3.4阻断或中和TLR4受体,可以减少AGE-LDL促进的HK-2细胞分泌IL-6 使用鼠抗人TLR4中和抗体或siRNA干扰TLR4表达,可以抑制AGE-LDL促进的HK-2细胞产生IL-6蛋白分泌(F=165.849,P=0.000) 已经 3.5 AGE-LDL对人肾小管上皮细胞TLR4表达的影响 本实验结果显示,AGE-LDL 100μg/ml对人肾小管上皮细胞的TLR4蛋白表达上没有影响(F=0.543,P=0.740) 四.Myd88/TRIF在AGE-LDL刺激HK-2细胞产生IL-6中的作用 4.1 AGE-LDL对HK-2细胞Myd88和TRIF表达的影响 本实验结果显示,AGE-LDL 100μg/ml对人肾小管上皮细胞的Myd88和TRIF蛋白表达没有影响(F=0.122,P=0.992) 4.2 Myd88和TRIF SiRNA分别抑制HK-2细胞表达Myd88和TRIF 使用上海吉泰生物科技公司的合成的人Myd88和TRIF siRNA,可以有效抑制HK-2细胞表达Myd88和TRIF SiRNA蛋白。 4.3 Myd88和TRIF SiRNA干扰后抑制(?)AGE-LDL促进的HK-2细胞产生IL-6 Myd88 siRNA干扰HK-2细胞后,可以有效的降低AGE-LDL和LPS诱导的HK-2所产生的IL-6 mRNA水平升高(F=l 10.374, P=0.000); TRIF siRNA干扰HK-2细胞后,对于AGE-LDL诱导的HK-2说产生IL-6 mRNA的没有明显的影响(P>0.05),而可以有效的降低LPS诱导的HK-2所产生的IL-6 mRNA水平升高(P0.05) 5.3阻断TLR4受体后,对AGE-LDL引起的HK-2细胞MAPK亚基磷酸化的影响 使用鼠抗人TLR4中和抗体或siRNA干扰TLR4表达后,可以降低AGE-LDL1001μg/ml在15min引起的HK-2细胞p38/MAPK(F=218.083,P=0.000)和JNK/MAPK磷酸化(F=67.954,P=0.000) 六.

3/10万,居恶性肿瘤首位(男性首位,女性第2位);肺癌病死率为61.0/10万,同样位居恶性肿瘤首位(男、女性均为首位)~([1])。在过去的30年来,随着对肺癌发生、发展认识的不断深入以及各种综合治
AIM: To reviewing 哪里 genetic and epigenetic make-up of metastatic colorectal cancers(m CRCs) addicted to epidermal growth factor receptor(EGFR) signalling.METHODS: The present study summarizes the potential

value of prognostic and predictive biomarkers in selecting m CRC patients treated with anti-EGFR therapy. A meta-analysis was performed using a systematic search of Pub Med, Medline and Web of Science to identify eligible papers until March 21 st, 2016 using these following terms: ‘‘colorectal cancer”, “predictive biomarkers’ ‘, “anti-EGFR therapy”, “KRAS”, PF-573228订单 “NRAS”, “PIK3CA”, “TP53″, “PTEN”, ‘‘EGFR”, “MET”, “HER2″, “epiregulin”, “amphiregulin”, “prognostic biomarkers”, “BRAF”, “miR NA” and “antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity(ADCC) activity”. Two investigators independently evaluated and extracted

data from each identified studies based on selected criteria of inclusion and exclusion. RESULTS: The introduction of agents targeting EGFR such as cetuximab and panitumumab increased overall survival of mC RCs. Nevertheless, it has firstly became evident that response rates to

cetuximab regimens in unselected patient populations were typically lower than 30%. Clinical data confirmed the predictive value of RAS mutations for resistance to cetuximab and panitumumab leading to the license of these monoclonal antibodies exclusively for the management of patients with RAS-wild type colorectal cancers. So far the identification Ispinesib of predictive biomarkers have generated interesting, though preliminary and, at times, conflicting data on the importance of tumour mR NA levels of EGFR ligands, of activating mutations in other genes such as NRAS and PIK3 CA. The prognostic value of selected micro RNAs level and ADCC activity is under investigation, while the prognostic impact of BRAF status remains controversial.CONCLUSION: This review focuses on the personalized treatment of m CRC and discusses the potential of new prognostic and predictive biomarkers in selecting patients treated with anti-EGFR therapy.