(2)本研究成功建立了 GADD45a低表达稳定转染细胞系,证明了 GADD45a可以调控喹乙醇诱导的ROS产生和线粒体凋亡通路。干扰GADD45a基因后,增加喹乙醇诱导的细胞凋亡和DNA损伤,且进一步激活JNK/p38通路。JNK抑制剂(SP600125)和p38抑制剂(SB203580)抑制JNK/p38通路后,显著抑制GADD45a的激活,同时增加喹以及乙醇诱导的细胞凋亡、DNA损伤和S期阻滞,表明JNK/p38通路在喹乙醇诱导的细胞凋亡中具有保护作用,证实了 JNK/p38通路部分参与了 GADD45a调控的喹乙醇诱导的细胞凋亡和S期阻滞。(3)本研究成功建立p21低表达稳定转染细胞系,证实了喹乙醇通过p53非依懒性方式抑制p21蛋白表达,AKT可以使p21磷酸化,并且诱导p2www.selleck.cn/products/shp099-dihydrochloride.html1蛋白从细胞核转移到胞浆中,发挥抗凋亡的作用。喹乙醇通过激活AKT和Nrf2/HO-1信号通路参与诱导HepG2细胞线粒体凋亡和S期阻滞,进一步验证了小鼠试验结果。PI3K/AKT抑制剂(LY294002)和Nrf2/HO-1抑制剂(ZnPP-IX)抑制AKT通路和HO-1信号通路后,增加喹乙醇诱导的细胞凋亡和周期阻滞,表明AKTRo-3306购买和Nrf2/HO-1信号通路的抑制发挥促凋亡的作用。干扰p21基因后通过进一步激活AKT通路、抑制Nrf2/HO-1信号通路,增加喹乙醇诱导的线粒体凋亡和S期阻滞。(4)喹乙醇诱导细胞毒性调控中GADD45a和p21调控方式主要是p53非依赖性的。进一步研究证实,p53在喹乙醇诱导的毒性中具有促凋亡的作用,p53基因缺失后减少喹乙醇诱导的线粒体凋亡,使用p53基因缺失小鼠模型进一步验证了 p53的促凋亡作用。