结论 miR-6775-3p甲基化可能导致其在乳腺癌组织中低表达,可能与乳腺癌的肿瘤浸润、转移及预后相关。
背景与目的 miRNA是一类长度为21～23个核苷酸的单链非编码RNA分子,其作用机制主要为靶向于mRNA的3’非翻译区(3’ untranslated region,3’UTR)从而抑制其靶基因的表达。mi无RNA在肿瘤的发生、发展过程中发挥着关键作用,探讨miR-26b-3p对乳腺癌生物学行为的影响及作用机制。方法 通过实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)检测miR-26b购买抑制剂-3p在三种乳腺癌细胞系MCF-7、MDA-MB-231和MDA-MB-453中的表达,选取miR-26b-3p表达水平最低的乳腺癌细胞转染miR-26b-3p mimics后,采用细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)法检测细胞的增殖,采用transwell迁移和侵袭实寻找更多验检测细胞迁移和侵袭能力,通过小动物活体成像及裸鼠移植瘤模型检测miR-26b-3p对乳腺癌细胞裸鼠移植瘤生长和转移的影响,采用双荧光素酶报告基因分析检测miR-26b-3p与锌指E盒结合同源盒基因1(zinc finger E-box binding homeobox 1,ZEB1)的相互作用,采用RTFQ-PCR和蛋白质印迹法(Western blot)检测ZEB1的表达。