结论形态学和分子生物学鉴定方法相结合能更准确地鉴定蜱的种类。
本研究旨在通过体外试验探究purR、purL基因

结论形态学和分子生物学鉴定方法相结合能更准确地鉴定蜱的种类。
本研究旨在通过体外试验探究purR、purL基因对L. plantarum KLDS1.0391 细菌素合成是否具有直接调控作用。基于L. plantarum KLDS1.0391 全基因组序列,通过PCR扩增得到PurR和PurL 蛋白的selleck激酶抑制剂编码基因,构建原核表达载体,将重组质粒导入大肠杆菌M15中进行诱导表达,采用镍柱亲和层析法纯化得到目的蛋白,透析后超滤浓缩,通过凝胶阻滞实验以及生物膜干涉技术研究两种蛋白与菌株细菌素合成调控区域是否具有结合作用。结果表明,PurR 蛋白以可溶性蛋白形式存在,PurL 蛋白以包涵体蛋白形式购买Y-27632存在,纯化后经聚丙烯酰胺凝胶电泳显示条带单一,达到电泳纯,经过浓缩后PurR 蛋白浓度为0.74 mg/ml,PurL 蛋白浓度为3.8 mg/ml。凝胶阻滞试验以及生物膜干涉技术结果表明,两个重组蛋白与菌株细菌素合成基因的启动子在菌体外无直接的结合作用,对于两种蛋白对细菌素合成的调控是否属于间接调控作用以及在菌体内的调控情况,需进一步研究。
为建立铁皮石斛的SCoT-PCR反应体系,本研究以8个不同增殖代的铁皮石斛组培苗为试验材料,采用正交试验设计,对影响PCR反应体系的2×Taq Master Mix混合液、引物、模板DNA的浓度进行优化,建立了铁皮石斛SCoT-PCR的最佳反应体系,筛选引物,并对1~8代的组培苗进行遗传稳定性鉴定。

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