瘤内注射pcDNA3.1-IGFBP7可明显遏制的肿瘤生长,与对照组相比差异具显著性(F=256.1,P<0.0014)。免疫印迹检测IGFBP7的表达,结果示pcDNA3.1-IGFBP7组瘤内注射转染pcDNA3.1-IGFBP7后可明显增加IGFBP7的表达,而pcDNA3.1-CONTROL与B16-F10组中IGFBP7的表达较低且程度一致,三组β-actin的表达selleck激酶抑制剂量无明显区别；表明pcDNA3.1-IGFBP7可特异性促进IGFBP7的表达,pcDNA3.1空质粒不能促进IGFBP7的表达且对β-actin的表达无影响。pcDNA3.1-IGFBP7与pcDNA3.1-CONTROL转染率相同,大约为50%；免疫组织化学检测结果提示pcDNA3.1-IGFBP7组中IGFBP7表达明显高于pcDNA3.1-C很少ONTROL与B16-F1O组(P0.05).VEGF在pcDNA3.1-IGFBP7组中的表达明显较pcDNA3.1-CONTROL组及无注射质粒组者低(P
目的:证实EGFR在胃癌组织中的表达强度与胃癌进展存在联系,构建人EGFR显性负性突变体真核表达载体pEGFPN1-DNEGFR,并进行鉴定,瞬时转染COS-7细胞后检测DNEGFR-EGF一般P蛋白表达及进行亚细胞结构定位;稳定转染人胃癌细胞株,探讨DNEGFR-EGFP负调控EGFR功能的机制,以及检测其对胃癌细胞恶性表型的作用,并明确分子机制。 方法: (1)应用免疫组织化学PV法,检测60例胃癌组织中EGFR的表达情况,并且分析其与临床病理特征的关系。 (2)将RT-PCR方法扩增得到的编码EGFR信号肽段、胞外区和跨膜区的cDNA,定向克隆至空载体pEGFP-N1中,构建真核表达载体pEGFPN1-DNEGFR。