方法采用黏附、侵袭实验评价HM0539处理后,大肠杆菌O157∶H7对HT-29细胞的黏附侵袭能力。通过免疫荧光、免疫印迹等方法进

方法采用黏附、侵袭实验评价HM0539处理后,大肠杆菌O157∶H7对HT-29细胞的黏附侵袭能力。通过免疫荧光、免疫印迹等方法进一步检测在使用HM0539治疗过程中对HT-29细胞中黏蛋白(MUC2)、紧密连接蛋白(ZO-1)表达的影响;通过动物实验,观察小鼠的生存率及体质量变化,检测攻毒小鼠的肠道病理及肠道屏障功能的改变。结果 HM0539呈浓度依赖性地抑制大肠杆菌OJNJ-64619178 IC50157∶H7黏附和侵袭HT-29,且HM0539的预处理效果优于共同处理(P<0.05);免疫荧光和免疫印迹等结果显示,HM0539不仅可以明显降低大肠杆菌O157∶H7感染后MUC2的表达水平(P<0.05),还可显著抑制其对细胞间紧密连接蛋白的破坏(P<0.05)。动物实验结果证明HM0539可抑制攻毒小鼠的体质量下降(P<0.05)和空肠的RSL3体内损伤;HM0539可抑制大肠杆菌O157∶H7诱导的空肠杯状细胞的破坏(P<0.05);此外,HM0539可上调攻毒小鼠空肠中的MUC2、ZO-1蛋白的表达(P<0.05)。结论 HM0539可抑制大肠杆菌O157∶H7黏附和侵袭HT-29细胞,而且增强了小鼠对大肠杆菌O157∶H7感染的抵抗力,其机制可能是通过抑制大肠杆菌O157∶H7破坏黏蛋可能白和细胞间紧密连接蛋白。
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