在体内研究部分,我们通过构建SMMC-7721-R肝癌荷瘤裸鼠模型,对复方免疫脂质体的抑瘤作用进行了评价,并利用主要器官的HE染色来考察复方免疫脂质体对荷瘤裸鼠主要脏器的毒性作用,最后用Western Blot对肿瘤组织的蛋白表达水平进行了进一步验证。研究结果1.我们构建的获得性Sorafenib耐药肝癌细胞系(SMMC-7721-R细胞)不仅或者在体外增殖抑制、流式凋亡中均表现出对Sorafenib的明显抵抗作用,还在裸鼠皮下移植瘤中表现出对Sorafenib抵抗作用。这表明获得性Sorafenib耐药人肝癌细胞系的构建成功。2.蟾毒灵在24 h、48 h和72 h的IC_(50)分别为1.52±0.23μmol/L、0.38±0.13μmol/L、0.20±RIP kinase抑制剂0.02μmol/L,蜂毒素在24 h、48 h和72 h的IC_(50)分别为5.32±0.23μmol/L、1.64±0.54μmol/L、1.13±0.20μmol/L,不同时间组别间的差异均有统计学意义(P<0.05)。Compu Syn分析结果显示蜂毒素和蟾毒灵具有协同抗肝癌作用,1.0μmol/L蜂毒素+0LXH254DMSO溶解度.2μmol/L蟾毒灵为最优协同药效配比,与流式细胞仪凋亡检测结果相吻合。3.RNA-Seq转录组结果提示,蜂毒素和蟾毒灵联合使用后转录组出现明显的改变,差异表达基因数量明显增多。进一步通过KEGG分析发现蜂毒素和蟾毒灵可能通过调节内质网应激来发挥抑制肝癌Sorafenib耐药的协同作用。4.蟾毒灵在PBS中的溶解度随着温度的升高而升高,但蟾毒灵的溶解速度均较慢、溶解度较低,12小时才基本达到饱和。