以流式细胞术检测细胞周期的改变,CCK-8法检测细胞增殖能力,克隆形成实验检测肿瘤细胞克隆形成能力,Transwell小室试验检测肿瘤细胞侵袭能力,同时检测细胞的葡萄糖消耗量和乳酸产生水平,Western blot检测糖代谢关键酶PKM、CS、己糖激酶(HK)的表达水平。结果荧光素酶报告基因结果显示,PKM和CS是miRNA-122的靶基因。MCF-7细胞转染mSelleckiRNA-122类似物后,G0/G1期细胞比例显著增高,而G2/M、S期细胞比例下降;细胞增殖率下调,miRNA-122组细胞增殖率低于Con组,差异有统计学意义(P<0.05)。与Con组比较,miRNA-122组细胞克隆形成能力、肿瘤侵袭能力下降,同时葡萄糖利用率和乳酸水平降低,HK、PKM表达水平下降,差异均有统计学意义(均P<0Nutlin-3 价格.05)。结论 miRNA-122可以通过靶向抑制肿瘤细胞糖代谢酶的表达,降低细胞糖代谢水平,从而抑制乳腺癌的转移和侵袭。
低(24. 32%±2. 30%vs. 18. 73%±0. 61%,P <0. 05,35. 01%±1. 24%vs. 16. 54%±1. 31%,P <0. 05);顺铂对CAL-27细胞周期没有特selleckchem异性改变。蛋白免疫印迹法结果显示,沙利霉素在上调CAL-27细胞中Caspase-3和Caspase-9蛋白表达(P <0. 05)的同时下调PARP、Akt和p-Akt蛋白的表达(P <0. 05)。结论
目的研究微小RNA-122(miRNA-122)通过降低Warburg效应抑制乳腺癌细胞增殖、侵袭的机制。方法荧光素酶报告基因验证miRNA-122与M型丙酮酸激酶(PKM)和柠檬酸合酶(CS)的关系。